[发明专利]用于制备抗真菌病原体的植物的多核苷酸和方法有效

专利信息
申请号: 200680019821.3 申请日: 2006-04-04
公开(公告)号: CN101189341B 公开(公告)日: 2016-10-19
发明(设计)人: K·E·布罗格利;K·H·布特勒;M·G·布特瑞尔;A·达西尔瓦孔塞桑;T·J·弗里;J·A·豪克;J·S·雅克思;E·S·琼斯;D·S·穆尔塔尼;P·J·沃尔特斯 申请(专利权)人: 纳幕尔杜邦公司;先锋高级育种国际公司;德拉华州大学
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 72001 代理人: 权陆军;梁谋
地址: 美国特*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 用于 制备 真菌 病原体 植物 多核苷酸 方法
【权利要求书】:

1.分离的多核苷酸,其包含选自下述的多核苷酸:

(a)编码赋予或增强对毛盘孢属的抗性的多肽的核苷酸序列,其中所述多肽的氨基酸序列当基于Needleman-Wunsch比对算法与SEQID NO:3相比较时,具有至少75%同一性;

(b)该核苷酸序列的互补体,其中所述互补体和核苷酸序列由相同数目的核苷酸组成,且100%互补;和

(c)编码赋予或增强对毛盘孢属的抗性的多肽的核苷酸序列,其中所述多肽的氨基酸序列当基于Needleman-Wunsch比对算法与保藏为专利保藏号NRRL B-30895的质粒的序列相比较时,具有至少75%同一性。

2.权利要求1的多核苷酸,其中所述多肽的氨基酸序列基于Needleman-Wunsch比对算法和SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少90%同一性。

3.权利要求1的多核苷酸,其中所述多肽的氨基酸序列基于Needleman-Wunsch比对算法和SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少95%同一性。

4.权利要求1的多核苷酸,其中所述核苷酸序列包含SEQ IDNO:3。

5.权利要求1的多核苷酸,其中所述核苷酸序列包含保藏为专利保藏号NRRL B-30895的质粒的序列。

6.包含权利要求1的多核苷酸的载体。

7.重组DNA构建体,其包含可操作地连接到至少一个调节序列上的权利要求1的多核苷酸。

8.转化宿主细胞的方法,其包含用权利要求1的多核苷酸转化宿主细胞。

9.权利要求8的方法,其中所述宿主细胞是植物细胞。

10.权利要求9的方法,其中所述植物细胞来自玉米。

11.包含权利要求7的重组DNA构建体的植物细胞。

12.包含权利要求1的多核苷酸的植物细胞。

13.权利要求12的植物细胞,其中所述植物细胞来自玉米。

14.生产植物的方法,其包含,用权利要求7的重组DNA构建体转化植物细胞,和从转化的植物细胞再生植物。

15.包含权利要求7的重组DNA构建体的植物。

16.权利要求15的植物,其中所述植物是玉米。

17.包含权利要求7的重组DNA构建体的种子。

18.权利要求17的种子,其中所述种子是玉米种子。

19.赋予或增强对毛盘孢属的抗性的方法,其包含,用权利要求7的重组DNA构建体转化植物,从而赋予或增强对毛盘孢属的抗性。

20.确定权利要求1的多核苷酸在玉米植物中存在或不存在的方法,其包含下述的至少一个:

(a)从所述玉米植物分离核酸分子,和扩增与权利要求1的多核苷酸同源的序列,或

(b)从所述玉米植物分离核酸分子,并进行DNA印迹杂交,或

(c)从所述玉米植物分离蛋白,并使用Rcg1蛋白的抗体进行蛋白印迹,或

(d)从所述玉米植物分离蛋白,并使用Rcg1蛋白的抗体进行ELISA测定,或

(e)证实从Rcg1 mRNA转录物衍生的、且Rcg1特有的mRNA序列的存在,从而确定权利要求1的多核苷酸在所述玉米植物中的存在。

21.确定Rcg1基因座在玉米植物中存在或不存在的方法,其包含下述的至少一个:

(a)从所述玉米植物分离核酸分子,和扩增与权利要求1的多核苷酸同源的序列,或

(b)从所述玉米植物分离核酸分子,并进行DNA印迹杂交,或

(c)从所述玉米植物分离蛋白,并使用Rcg1蛋白的抗体进行蛋白印迹,或

(d)从所述玉米植物分离蛋白,并使用Rcg1蛋白的抗体进行ELISA测定,或

(e)证实从Rcg1 mRNA转录物衍生的、且Rcg1特有的mRNA序列的存在,从而确定Rcg1基因座在所述玉米植物中的存在。

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