[发明专利]包括活化半胱天冬酶－3酶原的癌细胞内选择性细胞凋亡诱导

权利要求书

1.一种在癌细胞中选择性诱导细胞凋亡的方法，包括：(a)给予所述癌细胞能修饰所述癌细胞的半胱天冬酶-3酶原分子的化合物；并(b)修饰所述半胱天冬酶-3酶原分子，从而诱导细胞凋亡。

2.权利要求1的方法，其中所述癌细胞在需要治疗的患者体内。

3.权利要求1或2的方法，其中所述化合物具有式ZZ：

其中n＝1或2；R独立于其它R，为氢、卤素、烯丙基或短烷基；R2为氢、短烷基、酯或在生理条件下可除去的其它部分；R3为氢、卤素、烷基、卤代烷基、烯丙基、烯基、烯醇、烷醇或卤代烯基；R4和R5为N；或者R4为N且R5为C；或者R4和R5为C；并且A为氧或硫。

4.权利要求1-3任一项的方法，其中所述化合物选自结构式ZZ、PAC-1和结构5。

5.权利要求1-3任一项的方法，其中所述化合物为PAC-1。

6.权利要求1-3任一项的方法，进一步包括在癌细胞中评估半胱天冬酶-3酶原或半胱天冬酶-3参数的步骤；其中所述参数为所述半胱天冬酶-3酶原或半胱天冬酶-3的半定量的或定量的量、功能量和活性水平中的一个或多个。

7.一种结构式ZZ的化合物：

其中n＝1或2；R独立于其它R，为氢、卤素、烯丙基或短烷基；R2为氢、短烷基、酯或在生理条件下可除去的其它部分；R3为氢、卤素、烷基、卤代烷基、烯丙基、烯基、烯醇、烷醇或卤代烯基；R4和R5为N；或者R4为N且R5为C；或者R4和R5为C；并且A为氧或硫。

8.权利要求7的化合物，其中不包括结构为PAC-1的化合物，其中PAC-1的结构为：

9.一种在体外直接筛选能修饰半胱天冬酶-3酶原分子的化合物的方法，包括：(a)提供一种测试化合物；(b)提供经纯化的半胱天冬酶-3酶原；(c)将所述测试化合物暴露于所述经纯化的半胱天冬酶-3酶原；(d)在暴露于所述测试化合物后测量半胱天冬酶-3酶原的活性；(e)通过将暴露于所述测试化合物的测试活性与未暴露于所述测试化合物的未改变活性进行比较鉴定修饰性化合物；由此筛选能修饰半胱天冬酶-3酶原分子的化合物。

10.权利要求9的方法，进一步包括将所述发生改变的活性或所述未发生改变的活性与参照活性相比较；其中所述参照活性是暴露于这样一种化合物得到的，该化合物选自结构式ZZ、PAC-1和结构5。

11.一种在细胞内筛选能修饰半胱天冬酶-3酶原分子的化合物的方法，包括：(a)提供一种测试化合物；(b)提供一种细胞，其中所述细胞被推定表达半胱天冬酶-3酶原；(c)将所述细胞暴露于所述测试化合物；(d)在暴露于所述测试化合物后测量细胞参数，其中所述参数包括细胞活性、凋亡指示剂和其它参数中的一种或多种；(e)通过将暴露于所述测试化合物的测试细胞参数与未暴露于所述测试化合物的未改变细胞参数进行比较来鉴定修饰性化合物，由此筛选能修饰半胱天冬酶-3酶原分子的化合物。

12.权利要求11的方法，进一步包括将所述改变的活性或所述未改变的活性与参照活性相比较；其中所述参照活性是通过暴露于选自ZZ、PAC-1和结构5的化合物得到的。

13.一种鉴定或判断癌细胞对于用半胱天冬酶酶原活化化合物处理的潜在敏感性的方法，包括(a)评估所述癌细胞中的半胱天冬酶酶原参数；并(b)测定所述参数是否可使得对于半胱天冬酶酶原的活化的敏感性升高。

14.权利要求13的方法，其中所述半胱天冬酶酶原参数为半胱天冬酶-3酶原水平，并且所述半胱天冬酶酶原为半胱天冬酶-3酶原。

15.权利要求13的方法，其中所述半胱天冬酶酶原参数为半胱天冬酶-7酶原水平，所述半胱天冬酶酶原为半胱天冬酶-7酶原。

16.一种治疗癌细胞的方法，包括(a)鉴定癌细胞对于用半胱天冬酶酶原活化化合物处理的潜在敏感性；并(b)将所述癌细胞暴露于有效量的所述半胱天冬酶酶原活化化合物。

17.权利要求16的方法，其中所述半胱天冬酶酶原活化化合物选自式ZZ、PAC-1和结构5。