[发明专利]采用哺乳动物细胞确立人胚胎干细胞系

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求于2005年5月17日提交的、申请号为595/MUM/2005的印度临时专利申请的优先权。

关于联邦政府赞助的研究或研发的申明

不适用

“缩微胶片附件”的引用

不适用

发明背景

1.发明领域

本发明涉及从剩余胚胎的内细胞团分离、维持和繁殖人胚胎干细胞(hESC)。本发明也涉及鉴定分离的人ES细胞系，从而验证其体外分化潜能及其在细胞治疗和药物筛选中的预期用途。

2.相关文献的描述

来自胚泡内细胞团的多能干细胞称作胚胎干细胞，而来自发育的生殖(腺)嵴原生殖细胞的干细胞称作胚胎干细胞(Shamblott等，(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.95(23)：13726-31)。已经从哺乳动物胚泡的内细胞团(ICM)获得胚胎干(ES)细胞((Evans和Kaufman，(1981)Nature，292(5819)：151-9；Martin，(1981)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，78：7634-8)。这些细胞是多能的，能够发育成任何器官或组织类型。ES细胞能够在未分化状态体外增殖，在延长培养过程中维持正常核型，和维持分化为所有三层胚胎层(也就是中胚层，外胚层和内胚层)的潜能(Itskovitz-Eldor等，(2000)MoL Med.，6(2)：88-95)。ES细胞是有用的模型系统的代表，可用于研究多能细胞生物学的机制和早期胚胎的分化机制，以及提供遗传操作的机会。ES细胞适当的增殖和分化可用于产生无限制的细胞源，适用于基于细胞的治疗由细胞损坏或细胞功能失调导致的疾病。

已经从鼠胚泡阶段的胚胎ICM中分离出ES细胞(Solter和Knowles，(1975)72(12)：5099-5102)，也从其他几种物种中分离。例如，多能干细胞已经得自几种家养和实验室动物的植入前胚胎，例如牛(Evans等，(1990).Theriogenology，33：125-8)，猪(Evans等，(1990)supra；Notarianni等，(1990)J.Reprod.Fertil.SuppL，41：51-6)，绵羊和山羊(Meinecke-Tillmann和Meinecke，(1996)，J.Animal Breeding and Genetics，113：413-26；Notarianni，等，(1991)，J.Reprod.Fertil.SuppL，43：255-60)兔(Giles等，(1993)MoI.Reprod.Dev.，36(2)：130-8；Graves等，(1993)MoI.Reprod.and Dev.，36：424-33)，貂(Sukoyan等，(1992)，MoL Reprod.and Dev.，33：418-31)，鼠(Iannaccona等，(1994)，Dev.Biology，163：288-92)，仓鼠(Doetschman等，(1985)J.Embryol.Exp.MorphoL，87：27-45)，和恒河猴和狨猴(Thomson等，(1995)Proc.Natl.Acad.ScL92(17)：7844-8；和Thomson，等，(1996)，Biol.Reprod.，55：254-59)。Thomson等(1998)Science，282(5391)：1145-7；和Reubinoff等(2000)Nat.Biotech.，18(5)：559)已经报道了人ES细胞系的衍生。