[发明专利]初级细胞的转导

权利要求书

1.一种用于造血系统的初级细胞和/或造血干细胞稳定转导的方法，其包括以体外或离体的方式将所述细胞的表面与慢病毒载体和至少一种结合所述细胞表面的分子相接触，并且在有益于生长和/或增殖的条件下、在含有两层或多层的通风容器中培养所述细胞，其中所述容器适于培养至少约100,000,000个细胞。

2.一种用于造血系统的初级细胞和/或造血干细胞稳定转导的方法，其包括以体外或离体的方式将所述细胞的表面与慢病毒载体和至少一种结合所述细胞表面的分子相接触，并且在有益于生长和/或增殖的条件下、在含有两层或多层的通风容器中培养所述细胞，其中所述容器适于培养至少约100,000,000个细胞；和

其中用具有一定感染复数(MOI)的所述慢病毒载体转导所述细胞，以便每个转导的细胞的慢病毒载体的拷贝为大约0.5到大约10；和

其中将所述细胞与慢病毒载体接触大约24小时，且该接触任选地重复至少一次。

3.一种用于造血系统的初级细胞和/或造血干细胞稳定转导的方法，其包括以体外或离体的方式将所述细胞的表面与慢病毒载体和至少一种结合所述细胞表面的分子相接触，并且在有益于生长和/或增殖的条件下、在含有两层或多层的通风容器中培养所述细胞，其中所述容器适于培养至少约100,000,000个细胞；和

其中在大约7到10天后，或者在大约第14天时，至少约50％的所述细胞被稳定转导；和任选地，在大约14天后，至少50％的所述细胞保持稳定的转导；或者

其中在大约7到10天后，或者在大约第14天时，至少大约75％的所述细胞被稳定转导；并且任选地，在大约14天后，至少75％的所述细胞保持稳定的转导；或者

其中在大约14天后，80％、85％、89％、90％、91％、92％、93％、94％或95％以上的所述细胞被稳定转导；或者

其中用感染复数(MOI)为约2到约50、或约10到约30、或从10、或约20、或约30、或约40、或约50、或从约1到约400或500以下的所述慢病毒载体转导所述细胞；或者

其中用具有一定感染复数(MOI)的所述慢病毒载体转导所述细胞，以便每个转导的细胞的慢病毒载体的拷贝为大约1到大约100；或者

其中用具有一定感染复数(MOI)的所述慢病毒载体转导所述细胞，以便每个转导的细胞的慢病毒载体的拷贝为大约0.5到大约10；或者

其中将所述细胞与慢病毒载体接触大约24小时，且该接触任选地重复至少一次；和

其中所述细胞表面分子不诱导凋亡，并且所述细胞表面结合分子导致所述细胞更容易接受病毒慢病毒载体的转导。

4.权利要求1所述的方法，其中所述初级细胞分离自或源自对象。

5.权利要求4所述的方法，其中所述初级细胞通过下述的一个或多个步骤进行分离：

(a)通过对象血液的血液成分单采术分离；或

(b)从对象骨骼的骨髓分离；或

(c)通过异源对象血液的血液成分单采术分离；或

(d)从异源对象骨骼的骨髓分离。

6.权利要求4所述的方法，其中所述对象被人免疫缺陷病毒(HIV)所感染，其中任选地，所述HIV是HIV-1或HIV-2。

7.权利要求4所述的方法，其中所述对象患有癌症，其中任选地，所述癌症是乳腺癌。

8.权利要求4所述的方法，其中所述对象是人或动物。

9.权利要求1所述的方法，其中在与所述慢病毒载体或细胞表面结合分子接触之前，所述初级细胞可以通过将所述细胞通过密度梯度缓冲液和/或通过在磁场上免疫纯化进行富集。