[发明专利]生物合成途径的化学诱导表达

权利要求书

1.一种用于在生物合成途径中的酶的表达的重组载体，该重组载体包含两个或更多个元件，其中每个元件在5′至3′方向上可操作地连接有：诱导型启动子，其用于指导核酸序列进行转录；编码蛋白质的核酸序列；以及3′聚腺苷酸化信号序列。

2.权利要求1所述的重组载体，其中各个元件中的所述诱导型启动子选自四环素诱导型启动子、原始霉素诱导型启动子、病原体诱导型启动子、糖皮质激素诱导型启动子、雌激素诱导型启动子、铜诱导型启动子、除草剂安全剂诱导型启动子、乙醇诱导型启动子、异丙基-β-D-1-硫代半乳糖苷诱导型启动子、病原体诱导型启动子和蜕皮激素诱导型启动子。

3.权利要求2所述的重组载体，其中所述启动子是由化合物活化的蜕皮激素诱导型启动子，所述化合物选自：蜕皮激素、双苯酰肼、甲氧虫酰肼、幕黎甾酮A、松甾酮A、昆虫类固醇激素20-羟基蜕皮酮和笼蔽β-蜕皮激素。

4.权利要求1所述的重组载体，其中各个元件中的所述启动子是相同的启动子。

5.权利要求1所述的重组载体，其中各个元件中的所述启动子是不同的启动子。

6.权利要求1所述的重组载体，其中所述的两个或更多个元件包含编码蛋白质的核酸序列，所述蛋白质选自：β-酮硫解酶、乙酰乙酰辅酶A还原酶、PHB合成酶、PHA合成酶、苏氨酸脱水酶、脱水酶、异构酶、丙酰辅酶A合成酶、羟酰辅酶A合成酶、羟酰辅酶A转移酶、硫酯酶、脂肪酸合成酶和脂肪酸β-氧化酶。

7.权利要求1所述的重组载体，其中所述的两个或更多个元件包含编码蛋白质的核酸序列，所述蛋白质选自：硫酯酶、δ-9-去饱和酶、ω-3-去饱和酶、ω-6-去饱和酶、脂肪酸延长酶、羟化酶和三酰甘油生物合成酶。

8.一种用于在生物合成途径中的酶的表达的重组载体，该重组载体在5′至3′方向上可操作地连接有：由激活蛋白分子或复合物活化的启动子，该启动子用于指导两个或更多个核酸序列进行转录；两个或更多个分别编码蛋白质的核酸序列；以及3′聚腺苷酸化信号序列。

9.一种用于在生物合成途径中的酶的表达的重组载体，该重组载体包含两个或更多个元件，其中每个元件在5′至3′方向上可操作地连接有：由激活蛋白分子或复合物活化的启动子，该启动子用于指导两个或更多个核酸序列进行转录；编码蛋白质的核酸序列；以及3′聚腺苷酸化信号序列。

10.权利要求8或9所述的重组载体，其中所述核酸序列编码蛋白质，所述蛋白质选自：β-酮硫解酶、乙酰乙酰辅酶A还原酶、PHB合成酶、PHA合成酶、苏氨酸脱水酶、脱水酶、异构酶、丙酰辅酶A合成酶、羟酰辅酶A合成酶、羟酰辅酶A转移酶、硫酯酶、脂肪酸合成酶和脂肪酸β-氧化酶。

11.权利要求8或9所述的重组载体，其中所述核酸序列编码蛋白质，所述蛋白质选自：硫酯酶、δ-9-去饱和酶、ω-3-去饱和酶、ω-6-去饱和酶、脂肪酸延长酶、羟化酶和三酰甘油生物合成酶。

12.权利要求8或9所述的重组载体，其中所述启动子是四环素应答型启动子。

13.一种用于在生物合成途径中的酶的表达的重组载体，该重组载体包含两个或更多个元件，其中至少一个所述元件在5′至3′方向上可操作地连接有：诱导型启动子，其用于指导一个或更多个编码激活蛋白分子或复合物的核酸序列进行转录；一个或更多个编码激活蛋白分子或者复合物的核酸序列；以及3′聚腺苷酸化信号序列；并且至少一个所述元件在5′至3′方向上可操作地连接有：由激活蛋白分子或复合物活化的启动子，其用于指导两个或更多个核酸序列进行转录；两个或更多个分别编码蛋白质的核酸序列；以及3′聚腺苷酸化信号序列。

14.一种用于在生物合成途径中的酶的表达的重组载体，该重组载体包含三个或更多个元件，其中至少一个所述元件在5′至3′方向上可操作地连接有：诱导型启动子，其用于指导一个或更多个编码激活蛋白分子或复合物的核酸序列进行转录；一个或更多个编码激活蛋白分子或者复合物的核酸序列；以及3′聚腺苷酸化信号序列；并且至少两个所述元件分别在5′至3′方向上可操作地连接有：由激活蛋白分子或复合物活化的启动子，该启动子用于指导核酸序列进行转录；编码蛋白质的核酸序列；以及3′聚腺苷酸化信号序列。