[发明专利]在丝状真菌中重组表达防卫素

权利要求书

1.一种重组丝状真菌宿主细胞，其包含核酸构建体，所述核酸构建体包含编码防卫素的外源核酸序列和一个或多个内含子序列。

2.权利要求1的宿主细胞，其是曲霉属宿主细胞。

3.权利要求2的曲霉属宿主细胞，其是黑曲霉或米曲霉宿主细胞。

4.权利要求1-3任一项的宿主细胞，其中所述防卫素是α-防卫素、β-防卫素、θ-防卫素、节肢动物防卫素、昆虫防卫素或植物防卫素。

5.权利要求1-4任一项的宿主细胞，其能够以使用无内含子序列的核酸构建体时所得量的至少150％的量产生防卫素。

6.一种在丝状真菌宿主细胞中重组产生防卫素的方法，其包括培养丝状真菌宿主细胞，该宿主细胞包含核酸构建体，所述核酸构建体包含编码防卫素肽的核酸序列和一个或多个内含子序列；和回收防卫素肽。

7.权利要求6的方法，其中所述丝状真菌宿主细胞是曲霉属宿主细胞。

8.权利要求7的方法，其中所述曲霉属宿主细胞是黑曲霉或米曲霉宿主细胞。

9.权利要求6-8任一项的方法，其中所述防卫素是α-防卫素、β-防卫素、θ-防卫素、节肢动物防卫素、昆虫防卫素或植物防卫素。

10.权利要求6-9任一项的方法，其导致防卫素以使用无内含子序列的核酸构建体时所得量的至少150％的量产生。

11.核酸构建体的用途，该核酸构建体包含编码防卫素肽的核酸序列和一个或多个内含子序列，所述用途用于改进丝状真菌宿主细胞中防卫素的重组表达水平。

12.权利要求11的用途，其中所述丝状真菌宿主细胞是曲霉属宿主细胞。

13.权利要求12的用途，其中所述曲霉属宿主细胞是黑曲霉或米曲霉宿主细胞。

14.权利要求11-13任一项的用途，其中所述防卫素是α-防卫素、β-防卫素、θ-防卫素、节肢动物防卫素、昆虫防卫素或植物防卫素。

15.权利要求11-14任一项的用途，其中所述防卫素的表达水平与使用不包含内含子序列的核酸构建体的情况相比高至少50％。