[发明专利]用单克隆抗体体外诊断阿尔茨海默病的方法

说明书

发明领域

本发明涉及通过抗体的方式来诊断神经疾病，尤其是诊断阿尔茨海默病，所述抗体能够和与所述疾病有关的特异性肽相互作用。

背景技术

阿尔茨海默病(AD)是导致脑中神经元死亡的神经疾病。其通常进展缓慢，开始发生于50岁后并且其开始的症状可能会被归因于年老或普通的健忘。当疾病进展时，认知能力逐渐恶化，包括作出判断和进行日常生活的能力，个性可能发生变化，以及行为问题。在其晚期阶段，AD导致痴呆并最终导致死亡。目前，该疾病是不可治愈的并且是死亡率的主要原因。

目前，阿尔茨海默病通常通过临床现象进行诊断，因为确切的诊断仅能基于脑样品组织学检查(尸体解剖或活组织检查)，揭示在脑组织中的其表征性特征的存在。鉴于在活着的患者中进行脑活组织检查存在风险，很少使用这种方法，因此估计该疾病的体内诊断的错误率是约20-30％。

患有阿尔茨海默病的个体的脑中显示两种主要的病理学标记：神经原纤维变性(其通过神经原纤维缠结，营养不良的神经突和神经纤维网线的存在进行鉴定)和淀粉状蛋白物质的沉积(即通常缩写为Aβ的所谓的β-淀粉样蛋白肽的沉积)，它们以斑块的形式(扩散的斑块和神经炎性斑，这些后面提及的形式是该疾病的特征，并且象这样命名，是因为它们出现在神经元之间和之内)，和以血管沉积物(其存在于脑血管壁中)的形式存在。神经原纤维变性和淀粉状蛋白的沉积组成变性过程，这也与脑的正常老化相关。在没有遭受痴呆的年龄大的受试者中，Aβ肽主要以扩散斑的形式沉积。这种类型的沉积尤其在一些具有正常认知能力的受试者中突出，并且对于一些学者而言，其组成“病理性老化”的过程，这被当作脑的正常老化和AD之间的过渡过程(halfway)[1]。特别深入研究的是，扩散斑在神经炎性斑之前数年的过早发展似乎也发生在唐氏综合征(DS)中，其是由导致淀粉样蛋白前体蛋白(β-APP)的过表达的染色体21的三体性所引起的。尽管在具有正常认知能力的受试者的脑中可能观察到少量的神经炎性斑，在年长者中受AD影响的脑和受DS影响的脑的特征是大量成熟神经炎性斑的发展[2，3]。与包含Aβ的非原纤维形式(称为“前淀粉状蛋白”)[4]的扩散斑相反，血管淀粉状蛋白沉积物和神经炎性斑包含原纤维形式的Aβ肽并且与淀粉状蛋白物质的染料如刚果红和硫黄素T反应。

在AD中的认知下降与神经原纤维改变和皮质突触损失的进展线性相关[5]。没有观察到与扩散斑相关的局部突触损失[6]。相反，神经炎性斑与突触密度损失，神经原纤维改变和小胶质细胞的活化相关[7]。纯粹的神经原纤维变化和Aβ的沉积按照AD进展的充分建立的连续模式进行[8，9]。然而，尽管认知下降的程度与基于神经原纤维改变的连续阶段更好地相关[5]，在痴呆的临床显现中，AD的确定的神经病理学诊断基于与按照患者的年龄组所预期的相比，在有联系的新皮质区中显著更高密度的神经炎性斑的组织学证实(CERAD的共有标准：Consortium to Establish a Registry forAlzheimer’s Disease)[10]。神经炎性斑的形成组成AD中的中枢系统致病过程，因此，这些β-淀粉状蛋白沉积物的分子组成和与所述组成相关的与扩散斑的不同是目前AD研究中的主要关注的领域之一。

在最近数年里，关于在阿尔茨海默病患者的脑组织中的β-淀粉状蛋白的沉积物的分子组成的知识已经发生了根本性的改变。使用生化或免疫组化方法来鉴定Aβ肽的不同形式的各种研究已经提供了相当一致的描述，这容许传统形态学发现的分子解释。这些研究提供了被称为淀粉状蛋白假说的该疾病的统一的致病理论的基础[11]，尽管最近已经重新阐述了最初的假说，从而包括作为主要致病剂的可溶性Aβ寡聚物的新出现的作用[12]。目前，Aβ肽在AD中的主要的和重要的致病作用的假说导致了涉及预防或去除这些沉积物的新的治疗策略。