[发明专利]分析方法

权利要求书

1.一种分析采自人类或形成血管的非人动物受试者的血液样品中血浆高半胱氨酸的方法，所述方法包括：用以下试剂接触来自所述受试者的全血样品—液体稀释剂、还原剂、高半胱氨酸-转化酶、任选的所述酶的高半胱氨酸转化反应的抑制剂、细胞裂解剂、能够与所述高半胱氨酸转化酶的转化产物结合的颜色标记的结合剂，和能够与所述转化产物竞争与所述结合剂结合的颗粒；在用所述试剂接触后，抽吸所述样品通过具有多孔性的膜，所述多孔性足以使所述结合剂在其未结合状态时和当与所述转化产物结合时通过，但不足以使与所述颗粒结合时的所述结合剂从此通过；检测保持在所述膜上的所述结合剂的颜色标记；通过应用取决于所述全血样品中红细胞浓度的校正因子，由此确定血浆高半胱氨酸浓度的指标；以及任选的但是优选的，将所述血浆高半胱氨酸浓度表示为可视的或电子的信号；其中与所述试剂接触在如下情况下是相继的或同时的：

i)在与所述稀释剂、酶和还原剂接触后发生与所述裂解剂的接触；

ii)当抑制剂存在时，与抑制剂的接触发生在与所述稀释剂、酶和还原剂接触之后，但不晚于与所述裂解剂的接触；以及

iii)与所述粘合剂和所述颗粒的接触不包括与含有所述粘合剂和所述颗粒的液体接触。

2.如权利要求1所要求的方法，其中，在抽吸所述样品通过所述膜之前，将所述样品中的DNA片断化。

3.如权利要求1和2的任一项所要求的方法，其中所述试剂的至少一种以珠子形式提供。

4.权利要求1到3的任一项所要求的方法，其中所述颜色标记的结合剂是金属-珠子-标记的结合剂。

5.用于使用全血进行血浆高半胱氨酸分析的单次使用的盒，所述盒具有多孔的底座、可移动的顶端为毛细管的移液管和盖子，所述盖子带有顶端有膜的移液管，以及所述底座的孔含有以下的分析试剂：液体稀释剂；还原剂；高半胱氨酸转化酶；任选的，所述酶的高半胱氨酸转化反应的抑制剂；细胞裂解剂；能与所述酶的转化产物结合的、颜色标记的结合剂；以及能与所述转化产物竞争与所述结合剂结合的颗粒；所述结合剂和所述颗粒处在不同的所述孔中；当抑制剂存在时，所述抑制剂和所述酶存在于不同的所述孔中，所述裂解剂存在于孔中，该孔不同于含有所述酶和至少部分的所述还原剂和所述稀释剂的孔或多个孔。

6.如权利要求5所要求的盒，在所述底座中具有以线性排列的至少五个孔。

7.如权利要求5和6的任一项所要求的盒，在所述底座中的至少一个孔中具有至少一种含试剂的珠子。

8.如权利要求7所要求的盒，在至少一个所述移液管内具有至少一种所述珠子。

9.如权利要求5到8的任一项所要求的盒，在所述底座的至少一个所述孔中含有核酸酶。

10.一种分析在血浆中和在血细胞中存在的被分析物的方法，所述方法包括(a)测定所述被分析物在全血样品的血浆中的含量，(b)测定(优选分光光度)所述样品的血细胞比容或血红蛋白含量，以及(c)由此测定所述被分析物的血浆浓度。

11.一种用于诊断分析的单次使用的盒，包含具有多个孔的盒体，所述孔的至少一个含有用于所述分析的操作的试剂，其特征在于至少一个孔含有珠子，所述珠子在溶剂中释放至少一种所述试剂。