[发明专利]用脂质膜被覆粒子的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用脂质膜被覆粒子的方法。

背景技术

近年来，为了将药物、核酸、肽、蛋白质、糖等准确递送到靶向部位的载体的开发很盛行。例如，在基因治疗过程中，开发了将目的基因导入靶细胞的载体-逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒等的病毒载体。但是，病毒载体存在大量生产的困难性、抗原性、毒性等问题，因此，少有这样的问题出现的脂质体载体正在引起人们的关注。脂质体载体具有通过向其表面导入抗体、蛋白质、糖链等的功能性分子，能够提高对靶向部位的靶向性这一优点。

公知的脂质体的制备方法，例如有脂质膜的单纯水合法。根据脂质膜的单纯水合法，在基因等目的物质的存在下，能够通过将脂质膜水合制备将目的物质封入其中的多层膜脂质体(非专利文献1)。通过对这样制备得到的多层膜脂质体再次进行脂质膜的单纯水合法，能够在多层膜脂质体外侧得到多层新的脂质膜。就这样通过反复进行脂质膜的单纯水合法，能够增加多层膜脂质体中含有的脂质膜的数量。

非专利文献1：Kogure等，“Journal of Controlled Release”，2004年，98卷，317-323页。

但是，采用脂质膜的单纯水合法等以往的方法，脂质膜被不均匀的多层化，很难控制多层膜脂质体含有的脂质膜的数量。另外，采用脂质膜的单纯水合法等以往的方法，脂质膜只能像地层一样层层重叠在一块，脂质膜之间很难形成空间。

发明内容

因此本发明的目的在于提供一种能够用两张其间形成空间的脂质膜来被覆对象粒子的方法，以及提供通过该方法用两张脂质膜将对象粒子被覆而得到的脂质体。

本发明的第一种方法为，用两张脂质膜将带正电粒子被覆的方法，其特征在于，使所述带正电粒子与多个带负电SUV型脂质体接触，形成含有所述带正电粒子和已与所述带正电粒子静电结合的所述带负电SUV型脂质体的带负电复合物，用阳离子处理所述带负电复合物。

根据本发明的第一种方法，能够用其间形成空间的两张脂质膜被覆带正电粒子。通过本发明的第一种方法被覆带正电粒子得到脂质体，在被覆带正电粒子的两张脂质膜(形成于带正电粒子外例的第一脂质膜以及形成于第一脂质膜外侧的第二脂质膜)之间形成空间，所要求的物质能够保留在该空间。

本发明的第一种方法中，所述带正电粒子优选为目的物质的聚集物。此时，通过本发明的第一种方法能够制作封入目的物质的聚集物，且被覆目的物质的聚集物的两张脂质膜之间形成有空间的两张膜脂质体。

本发明的第一种方法中，所述带正电粒子优选为带正电的n张膜脂质体(n是大于1的整数)。此时，通过本发明的第一种方法能够制作被覆带正电的n张膜脂质体的两张脂质膜之间形成有空间的(n+2)张膜脂质体。

本发明的第一种方法中，所述带正电粒子的ξ电位优选为20～30mV，所述带负电SUV型脂质体的ξ电位优选为-20～-30mV。此时，能够很有效地形成含有带正电粒子和已与该带正电粒子静电结合的多个带负电SUV型脂质体的带负电复合物。

本发明的第一种方法中，所述带正电粒子的粒径优选在50nm以上。此时，能够很有效地形成含有带正电粒子和已与该带正电粒子静电结合的多个带负电SUV型脂质体的带负电复合物。

本发明的第二种方法为，用两张脂质膜将带负电粒子被覆的方法，其特征在于，使所述带负电粒子与多个带正电SUV型脂质体接触，形成含有所述带负电粒子和与所述带负电粒子静电结合的所述带正电SUV型脂质体的带正电复合物，用阴离子处理所述带正电复合物。

根据本发明的第二种方法，能够用在其间形成空间的两张脂质膜被覆带负电粒子。通过本发明的第二种方法被覆带负电粒子得到脂质体，在被覆有带负电粒子的两张脂质膜(形成于带负电粒子外侧的第一脂质膜以及形成于第一脂质膜外侧的第二脂质膜)之间形成空间，所要求的物质能够保留在该空间。

本发明的第二种方法中，所述带负电粒子优选为目的物质的聚集物。此时，通过本发明的第二种方法能够制作封入目的物质的聚集物，且被覆目的物质的聚集物的两张脂质膜之间形成有空间的两张膜脂质体。

本发明的第二种方法中，所述带负电粒子优选为带负电的n张膜脂质体(n是大于1的整数)。此时，通过本发明的第二种方法能够制作被覆带负电的n张膜脂质体的两张脂质膜之间形成有空间的(n+2)张膜脂质体。