[发明专利]一种二维阵列液相色谱－质谱联用方法

说明书

技术领域

本发明涉及复杂样品的多维液相色谱分析技术，具体地说是一种二维阵列液相色谱-质谱联用方法。

背景技术

近年来随着研究的深入，人们已经认识到了复杂样品中很多难检测到的微量组分可能扮演着重要角色，所以复杂样品(如生物样品、环境样品、天然草药等)的全成分分析就成为了分析化学领域研究的热点和难点。多维色谱技术被公认为有着强大的分离能力。作为其中较成熟的技术，全二维气相色谱为挥发性复杂样品的全成分分析提供了强大的技术支撑(Tranchida，P.Q.；Dugo，P.；Dugo，G.；Mondello，L.J.Chromatogr.，A 2004，1054，3-16；Dallüge，J.；Beens，J.；Brinkman，UAT.J.Chromatogr.，A2003，1000，68-108)。相比之下，二维液相色谱虽然具有更大的应用领域，但因液相色谱的分析速度和柱效都远不及气相色谱，使LC×LC的研究一直没有取得令人振奋的进展(Kimura，H.；Tanigawa，T.；Morisaka，H.；Ikegami，T.；Hosoya，K.；Ishizuka，N.；Minakuchi，H.；Nakanishi，K.；Ueda，M.；Cabrera，K.；Tanaka，N.J.Sep.Sci. 2004，27，897-904)。

在全二维液相色谱中，为了保证在下一个流分注入之前当前的分析能完成，第二维的分析速度必须很快。所以在这种理念的指导下，目前大家普遍关注的研究热点是如何在现存的全二维模式的基础上实现第二维的高速分离。短柱(Opiteck，G.J.；Jorgenson，J.W.；Anderegg，R.J.Anal.Chem.1997，69，2283-2291；Opiteck，G.J.；Ramirez，S.M.；Jorgenson，J.W.；Moseley，M.A.Anal.Biochem.1998，258，349-361；Wagner，K.；Miliotis，T.；Marko-Varga，G.；Bischoff，R.；Unger，K.K.Anal.Chem.2002，74，809-820)、整体柱(Kimura，H.；Tanigawa，T.；Morisaka，H.；Ikegami，T.；Hosoya，K.；Ishizuka，N.；Minakuchi，H.；Nakanishi，K.；Ueda，M.；Cabrera，K.；Tanaka，N.J.Sep.Sci.2004，27，897-904)、高温HPLC(Stoll，D.R.；Carr，P.W.J.Am.Chem.Soc.2005，127，5034-5035)相继被采用，不可否认它们为LC×LC注入了新的元素，但很短的分离时间限制了他们的分离能力。为了从根本上提高二维液相色谱的分离能力，就应该适当提高第二维的分析时间，增加第二维的色谱柱长，但这些都与传统二维第二维的快速分离理念相违背，也是传统全二维液相色谱很难做到的。

发明内容

为了克服传统体系存在的主要问题，本发明将如何实现高峰容量与高分析速度的有效结合作为首要出发点。本发明的系统峰容量大，分离效率高；检测灵敏，在线定性简单；系统设计简单，可商品化前景大；分析对象范围广泛。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种二维阵列液相色谱-质谱联用方法，被分析样品经第一维色谱的分离之后，进入第二维进行进一步的高效分离；第一维经单一色谱柱流出的流分经接口进入第二维色谱；第二维流动相经色谱泵打出后通过接口由分流装置分流，打入第二维色谱柱中；第二维色谱柱采用阵列模式，且阵列中每根色谱柱以同样的色谱条件进行同步分离；第二维每根色谱柱的出口与多通道检测器的一个通道相连，进行同步高灵敏检测。

所述的第一维色谱可以为反相色谱、体积排阻色谱、离子交换色谱或亲和色谱等几乎所有类型的色谱；接口可以是样品存储环、富集柱或三通阀等；

第二维色谱柱阵列由两根或两根以上的相同或不同的色谱柱组成；第二维色谱柱采用与第一维分离机理不同的填料，它也可以包括反相色谱、体积排阻色谱等很多类型的色谱。其中的色谱柱阵列中的色谱柱可以是相同填料，也可以是不同填料。但均采用同样的洗脱条件进行同步分离；最好应第二维色谱柱阵列中每根色谱柱所处通道的阻尼相同；本发明第二维色谱泵出口采用分流技术，保证各个通道流动相组成与流速完全相等。

所述的检测器是多通道检测器，可以包括多通道质谱检测器、多通道紫外检测器、多通道蒸发光散射检测器等。