[发明专利]一种氨基葡萄糖四糖的合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及有生物活性的寡糖的制备，具体地说是一种能用于药物筛选的氨基葡萄糖四糖的简易合成方法。

背景技术

β1→4连接的氨基葡萄糖寡糖也称壳寡糖，目前对于壳寡糖生物活性的研究报道很多。研究表明壳寡糖具有抗菌，抗肿瘤，提高免疫力等多方面的活性。壳寡糖生物活性研究所采用的材料一般是由壳聚糖降解得到的壳寡糖混合物，因此获得纯的壳寡糖是研究壳寡糖结构与功能关系的基本原料。

文献1(Mohamed R.E.Aly，El-Sayed I.Ibrahim.Carbohrdr.Res.2001，31，129-142.)报道了β1→4连接的氨基葡萄糖四糖及六糖的经典合成方法。

文献2(Feng Yang，Hongmei He and Yuguo Du.TetrahedronLett.2002，43，7561-7563.)，文献3(Feng Yang，Yuguo Du.Carbohrdr.Res.2003，338，495-502)阐述了寡糖合成中基本的供体及受体的合成方法。

缺点：已报道的β1→4连接的氨基葡萄糖四糖及六糖的合成方法步骤较为繁琐，保护基苄基不易脱去。

发明内容

本发明的目的在于优化了现有壳寡糖四糖的合成方法，提供一种氨基葡萄糖四糖的合成方法，较已报导的方法大大简化，适于大量制备。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种氨基葡萄糖四糖的合成方法，以辛基-β-(1→4)连接的氨基葡萄糖二糖糖苷为受体，以β1→4连接的氨基葡萄糖二糖硫苷为供体，以路易斯酸和碘代琥珀酰亚胺作催化剂，于有机溶剂中合成氨基葡萄糖四糖。

所述供体与受体的摩尔比＞1，反应温度为-5-15℃，反应时间20分钟以上，碘代琥珀酰亚胺相对于供体的摩尔用量为1.0至1.2当量，易斯酸相对于供体的摩尔用量为0.07至0.15当量；

供体的结构式为：

R1＝甲基，乙基或异丙基

受体的结构式：

R2＝辛基或甲基

所述供体为异丙硫基3，4，6-三-氧-乙酰基-2-脱氧-2-邻苯二甲酰亚胺基-β-D-葡萄吡喃糖-(1→4)-6-氧-叔丁基二甲基硅烷基-2-脱氧-2-邻苯二甲酰亚胺基-β-D-葡萄吡喃糖苷，受体为辛基6-氧-叔丁基二甲基硅烷基-2-脱氧-2-邻苯二甲酰亚胺基-β-D-葡萄吡喃糖-(1→4)-6-氧-叔丁基二甲基硅烷基-2-脱氧-2-邻苯二甲酰亚胺基-β-D-葡萄吡喃糖苷。缩合反应采用的有机溶剂可为卤代烷烃，醚或酰胺。

较佳的缩合反应体系可为：

以β1→4连接的二糖硫苷1为糖基供体，β1→4连接的辛基氨基葡萄糖二糖糖苷2为受体，路易斯酸催化得到氨基葡萄糖3和4，硅胶柱分离后脱去保护基团即得到氨基葡萄糖四糖5和6；反应式如下所示，

TBS＝叔丁基二甲基硅基，Ac＝乙酰基，phth＝邻苯二甲酰基。

其中：1→4连接的氨基葡萄糖二糖硫苷供体1由氨基葡萄糖的三氯乙酰亚胺酯7

和氨基葡萄糖硫苷8缩合得到，如下反应式所示：

其中：β1→4连接的辛基氨基葡萄糖二糖糖苷受体2由氨基葡萄糖硫苷9和辛基葡萄糖苷10缩合，脱乙酰基得到，如下反应式所示：

两种四糖3和4的分离需用硅胶柱，洗脱剂需用二氯甲烷和乙酸乙酯体系或石油醚和乙酸乙酯体系。所述的缩合反应需用有机溶剂氯代烷烃做反应体系，需用路易斯酸做催化剂；所用的有机溶剂最好是二氯甲烷，所用的路易斯酸最好是三甲基硅三氟甲磺酸酯。

本发明的优点为：将β1→4连接的氨基葡萄糖四糖的合成用供体与部分保护的受体缩合完成，以辛基氨基葡萄糖二糖糖苷为受体，以氨基葡萄糖二糖硫苷为供体，以路易斯酸为催化剂，简易合成氨基葡萄糖四糖，相对于已报道的方法步骤简单，易于操作，反应时间短，试剂用量少，适于大量制备。另外，在得到目标四糖外还同时获得另一种结构类似的四糖，同样可进行活性筛选。

β1→4连接的氨基葡萄糖四糖属于壳寡糖，研究表明壳寡糖混合物具有抗菌，抗肿瘤，提高免疫力等多方面的活性，具有潜在的药用开发价值。

合成结构确定的寡糖能够为研究壳寡糖结构与功能的关系，提供糖生物学研究原料，开发壳寡糖四糖的药用活性奠定了基础。

合成路线较已报道的方法简单易行，适于大量制备。另外，在得到目标四糖外还同时获得另一种结构类似的四糖。

为提供糖生物学研究原料，研究寡糖结构与功能的关系，开发壳寡糖四糖的药用价值奠定了基础。

具体实施方式