[发明专利]桦树皮中白桦脂醇的提取纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物化学领域，具体涉及一种从桦树皮中提取纯化白桦脂醇的方法。

背景技术

桦树皮为桦木科落叶乔木白桦的树皮，是伐木业的副产物。它含白桦脂醇，脂肪酸、鞣质、多糖类、皂甙和少量的白桦脂酸等三萜类化合物。其中，白桦脂醇的含量为重量百分比23％～33％。白桦脂醇具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗炎和抗病毒活性等，具有很大的开发价值。由白桦脂醇合成的白桦脂醇衍生物具有更强和更广泛的生物活性。

到目前为止，已有的分离提纯方法有以下几种，但都存在各种各样的缺陷，无法满足生产的需求：

(1)专利RU 2270202采用甲基叔丁醚(MTBE)提取白桦脂醇，而MTBE可导致环境高度污染。

(2)专利US 6,815,553中，将大块树皮干燥至水分小于10％后，经机械分离成外树皮和内树皮，外树皮再喷上树皮重量2～5％的水，再机械破碎成粒径为2～2.5mm的颗粒，100～110℃下干燥10小时，采用超临界二氧化碳萃取白桦脂醇。该方法中，树皮破碎的工艺繁琐，设备投资大，生产成本高。

(3)专利CN 1634972采用乙酸乙酯提取粉碎的白桦树皮，之后减压浓缩，静置后过滤，收集沉淀，将沉淀添加活性炭后用甲醇回流提取，减压回收甲醇，收集得到白桦脂醇，其纯度大于80％，但得率仅为1.7％。

(4)采用传统的层析方法。传统层析方法有两种加样方法：溶液加样与拌样加样。因白桦脂醇在常用的有机溶剂中溶解度较小，故两种加样方法都需用至少白桦脂醇10倍重量体积比的有机溶剂将其溶解。并且，没有合适的有机溶剂能同时满足白桦脂醇加样溶解和层析洗脱的条件。传统拌样加样需先用有机溶剂将粗白桦脂醇样品完全溶解，再加2～5倍样品重量的填充剂拌匀，挥干或减压蒸干，磨细。该方法工艺繁琐，成本高。此外，传统层析装柱所需填充剂用量很大，一般是样品重量的10～100倍。因此传统的层析方法不适宜于白桦脂醇的大规模提取纯化。

发明内容

本发明的目的是提供一种简单可行、得率较高、纯度较高、成本较低，且适合工业化的从桦树皮中提取纯化白桦脂醇的方法。

本发明的上述目的是通过下列技术方案来实现的，本发明的方法包括如下步骤：

(1)将桦树皮切碎，制得树皮颗粒。

本发明中，所述的树皮颗粒的粒径范围较佳的为2～15mm，更佳的为3～12mm，再更佳的为4～10mm，最佳的为5～8mm。

(2)将树皮颗粒放入乙醇或乙醇水溶液中加热回流提取，之后过滤。

本发明中，步骤(2)中所述的乙醇水溶液中乙醇的浓度较佳的为体积百分比70～100％；树皮颗粒与乙醇或乙醇水溶液的重量体积比较佳的为1g∶5mL～1g∶12mL，更佳的为1g∶8mL～1g∶10mL；可反复提取多次，次数较佳的为2～6次。

(3)减压浓缩滤液，冷却，收取析出的粗白桦脂醇，干燥即可。

本发明中，第一次收取粗白桦脂醇后，可再将上层液继续减压浓缩，冷却，收取析出的粗白桦脂醇，与第一次所得粗白桦脂醇合并；重复上述操作直至上层液中无粗白桦脂醇析出，废弃上层液。其中，减压浓缩较佳的至原溶液体积0.2～0.6时为止。

本发明中，步骤(3)中干燥前，较佳的用乙醇水溶液洗涤粗白桦脂醇，去除水溶性杂质，之后再干燥。其中，所述的乙醇水溶液中乙醇的浓度较佳的为体积百分比5～40％，更佳的为20～30％；可洗涤多次，次数较佳的为2～3次。

本发明实例中，步骤(3)之后，为进一步提高白桦脂醇的纯度，可较佳的再进行下面两个步骤：

(4)将粗白桦脂醇制成样品干粉，方法有三种：磨细后直接作为样品干粉；或磨细后加入填料拌匀，制得样品干粉；或加有机溶剂使粗白桦脂醇部分溶解或混悬，加入填料拌匀，再蒸干溶剂磨细制得样品干粉。

其中，所述的填料较佳的为活性碳、硅藻土、硅胶或氧化铝；所述的粗白桦脂醇与填料的重量比较佳的为小于或等于1∶5.0，更佳的为1∶0.2～1∶1.0；所述的有机溶剂较佳的为乙酸乙酯、石油醚、丙酮、二氯甲烷或甲醇；粗白桦脂醇与有机溶剂的重量体积比较佳的为1∶1～1∶10。

(5)在过滤器下部先铺一层填料，再加样品干粉，用混合溶剂洗脱，收集含白桦脂醇的洗脱液，减压回收溶剂，即制得白桦脂醇粉末。

其中，所述的填料较佳的为活性碳、硅藻土、硅胶或氧化铝；填料与样品干粉的重量比较佳的为1∶1～1∶100，更佳的为1∶5～1∶30；所述的混合溶剂较佳的为石油醚与丙酮的混合液、石油醚与乙酸乙酯的混合液、丙酮与正己烷的混合液。