[发明专利]血红蛋白电泳琼脂糖凝胶板及其制作方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种血红蛋白电泳琼脂糖凝胶板及其制作方法，它是在做血红蛋白电泳分离时所使用的载体，属体外诊断试剂。

背景技术

传统的手工电泳方法是在电泳槽内加缓冲液，用醋酸纤维素膜作载体，用手工将血清加在载体上，然后接通电源，开始电泳，它的缺点是：①操作起来很麻烦，做一次电泳标本，需一个人忙七、八个小时才能完成；②电泳质量不高，分辨率低，区带不明显且歪歪扭扭，精度差，又不能长期保存；③数据处理麻烦，电泳完了用剪刀把每条区带剪开，分头在一种专用溶液里进行洗脱，把洗下来的液体在比色计上进行比色，换算成百分比，这种方法非常不准确，而且计算起来也特别麻烦；④手工点样无法控制它的点样量，点样存在不一致性，电泳区带不在一条线上，且电泳出来的区带是歪歪扭扭的。其实电泳分离技术能为临床诊断提供重要依据，但由于方法落后，操作复杂，电泳质量不高，提供的数据不准确，使医院逐渐不开展电泳分离技术，阻碍了这门学科的发展。

发明内容

本发明的目的在于提供一种使用方便，节省时间，分离区带清晰准确，分辨率高，保存期长的，可用于血红蛋白电泳分离时作载体用的琼脂糖凝胶板及其制作方法。

本发明的目的是由如下技术方案实现的，琼脂糖凝胶板为两层结构，底层为亲水性塑料板，上层为琼脂糖胶，两层之间用无化学反应透明胶粘合。

琼脂糖胶的配方如下：

三羟甲基氨基甲烷(C₄H₁₁NO₃)             12～15克

乙二胺四乙酸二钠(C₁₀H₁₄N₂Na₂O₈2H₂O)    1～2克

硼酸(H₃BO₃)                            4～6克

磷酸二氢钾(KH₂PO₄)                     3.5～5.5克

磷酸氢二钠(Na₂HPO₄)                    2～4克

将上述五种组分按配比溶入1000毫升蒸馏水中配制成溶液

琼脂糖          每100毫升上述溶液中含0.5～2.0克

其制作方法包括以下步骤：

①先将三羟甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸二钠、硼酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠按上述配比溶入蒸馏水中，搅拌均匀，充分溶解，配制成溶液；再按上述相应的配比放入琼脂糖搅拌，将盛放上述混合溶液的容器，放在水浴锅内加热，保湿保温，待琼脂糖全部溶解后保持在70℃-85℃恒温；

②将亲水性塑料板上表面中央位置涂上无化学反应透明胶，四周留3毫米左右的边框不涂胶，然后置于胎具的底模板上，再将上模板扣上，用定位销固定。

③将固定好的胎具放在恒温加热板上，温度恒在50-65℃；

④倒胶，用专用吸液器吸出足够量的琼脂糖胶，加压挤在胎具内，在压力的作用下，琼脂糖胶能顺畅排净胎具内的气体而充满胎具空间；

⑤把浇满琼脂糖胶的胎具放在阶梯冷却恒温板上，慢慢的平稳冷却，使琼脂糖胶慢慢凝成半干式状态；

⑥20分钟后用专用工具把胎具打开，把铺好的凝胶板进行检验，完好无损即可放在盒内封好；再用铝塑袋密封。

所述制作方法步骤④中所用的压力，只是用手挤压的压力。

所述凝胶板厚度在0.3～0.9毫米，且均匀不能出现凹凸不平现象，不能厚薄不均匀，如果出现上述现象就无法保证电泳区带的质量。故对表面平整性、均匀性要求很严格。凝胶板一般为正方形，也可为长方形，上层琼脂糖胶比底层亲水性塑料板四周均小3毫米左右。

所述无化学反应的透明胶可为明胶或猪皮胶等。

所用胎具可拆装，当亲水性塑料板置于胎具底模板时，亲水性塑料板已涂有无化学反应的透明胶，因此，当琼脂糖胶占满胎具空间时，其底部即与亲水性塑料板粘合成一体。

成型胎具出气孔要开的合理科学，不产生死角，使液态琼脂糖胶能很均匀的把气排出去，从而使琼脂糖胶薄层流的也就很均匀；