[发明专利]微生物快速检测显色碟片及其制备方法

说明书

发明领域

本发明涉及微生物的检测，更特别的涉及一种用于检测微生物的碟片及其制备方法。

技术背景

“食品安全”是12个“十五”国家重大科技专项之一，它关系到国计民生和人民生命安全与健康，是当前国民经济和社会发展急需解决的问题。而食品中病源微生物引起的危害一直是食品安全中最大的威胁之一。近几年，全球不断爆发食源性疾病事件如：欧洲的“口蹄疫事件”、“疯牛病事件”，美国李斯特氏菌食物中毒事件，日本大肠杆菌O157:H7事件，美国奶粉的坂崎肠杆菌事件等，“食品安全”问题已成为全球关注的焦点。

目前，我国进出口食品微生物检测均采用传统方法，其通常使用琼脂糖培养基，虽然准确性强，但存在检测时间长、检测步骤烦琐、对检测人员技术水平要求高等缺点。随着经济全球化进程的加快，国际食品贸易的迅速增加，传统微生物检测方法费时费力的缺点越来越突出，检测速度是除贸易壁垒以外影响出口的主要因素，因此，快速检测方法越来越受到重视，快速检测产品应用也越来越广泛。

目前国内外已有多种基于快速酶触反应方法的产品，其中大部分是显色(或荧光)培养基，目标微生物在其上生长后具有特异的颜色，易于判别，但是由于其通常仍使用琼脂，因此干粉显色培养基仍需要进行配制、高压灭菌和铺制平板等，耗费一定的人力和时间。

显而易见，一种能够利用显色培养基高特异性、高灵敏度、易于判别的优点，又能避免繁琐和较长时间操作的一次性新产品成为开发的热点。本发明正是基于此点，致力于开发一种能够适应快速检测微生物的新产品。

发明内容

为了克服现有微生物检测中的缺陷，实现对微生物的快速大批量检测，发明人进行了研究，并开发了一种新型的微生物快速检测显色碟片及其制备方法。该产品集和了显色培养基和便携式一次性平板的优点，采用快速酶促反应显色培养基作为基础，用无纺布和瓜尔胶体系代替了传统培养基中的琼脂作为载体，将它们制备在便携式一次性平皿内，即时可用，方便快捷，且其保质期长(至少为1年)。

该产品可以应用于食品、饮料、化妆品、药品和饮用水等方面的微生物卫生质量检测，环境微生物污染的监测，医学临床的疾病诊断、流行病学研究。

在本发明的一个方面中，提供了一种微生物快速检测显色碟片，其由以下几个部分构成：主体是一次性培养皿，其由培养皿底和培养皿盖组成，其材料可以是从由聚苯乙烯、聚苯丙稀、聚碳或其类似的所组成的组中选择的高分子塑料；培养皿内底部粘附有一层与培养皿底内径一致的具有通透性的无纺布，无纺布上均匀吸附有一层水溶性胶粘剂和水溶性可供微生物生长的基质，其中，该基质包括可供微生物生长的各种营养物质、生长因子、调解基质pH值的碳酸钠、抑制非目标菌生长的抑制剂以及使微生物菌落着色的化学物质或酶底物，其均为水溶性物质，且不含有凝固剂。

本发明的一个实施方式中，一次性培养皿是无色透明的，其由培养皿底和培养皿盖组成，培养皿底主要部分包括圆形培养皿，直径为60mm，以及长方形的可以用于标记的突起部分，培养皿盖为圆形，其可以与培养皿底圆形部分紧密吻合。

在本发明的另一个实施方式中，无纺布为白色，材料为从聚酯纤维、木浆短纤维、粘胶纤维、涤纶、棉及其类似的所组成的组中选择的，其外观为细小网格状，具有通透性，平方米克重为20～40g/m²，酸碱度为中性，断裂强力纵向为至少35N/5cm，横向为至少7N/5cm，吸水量为10～15g/g。

在本发明的另一个实施方式中，胶粘剂为瓜尔胶，其为水溶性天然植物胶。

基于该产品的特征，其优势是显而易见的。由于无纺布和瓜尔胶体具有良好的通透性、疏松的网状结构及较大的表面积，因此更有利于微生物的生长。该产品无须配制和高压灭菌，为一次性即时可用产品，因此用户可以不用购置大量昂贵的微生物检测仪器设备，不用投入大量的人力制备培养基和清洗培养器皿等。该产品经过真空冷冻干燥，去除了95～99％的水分，克服了制备好的琼脂平板易脱水、易染菌、不能长期保存的缺点。

在本发明的另一个方面中，提供了一种制备微生物快速检测显色碟片的方法，其主要包括下列步骤：

a)将无纺布和培养皿进行无菌处理；

b)用激光切割的方法将上述无纺布裁剪成φ50mm的圆形，激光切割法可保证无纺布的横向及纵向拉伸强度不发生改变，保证了无纺布的平均孔径在0.4-1.2μm之间，因此可满足微生物生长的需要；

c)通过机械装置采用负压吸附及正压放置实现将切割后的无纺布平整地贴附在培养皿底部；