[发明专利]用反相色谱法分离和纯化三氯庶糖及其合成中间体化合物

说明书

技术领域

本发明涉及用反相色谱方法从蔗糖氯化反应产物中分离和纯化三氯蔗糖的方法，也涉及用反相色谱方法来分离、纯化合成三氯蔗糖的目标中间产物的方法。本发明中采用的反相色谱方法是采用高分子型反相色谱固定相来进行的分离方法。

背景技术

三氯蔗糖，化学名为4，1’，6’三氯-4，1’，6’-三脱氯半乳型蔗糖，英文名sucralose，4，1’，6’-trichloro-4，1’，6’-trideoxygalactosucrose。其分子式为C₁₂H₁₉O₈C₁₃，分子量397.64。它是一种新型甜味剂，其优异的特点是高甜度，口感与蔗糖相似，化学稳定性好、低热量、无毒、抗龋齿。作为一类理想的非营养型甜味剂，已被我国、欧美各国批准在食品、饮料、医药中使用，具有广泛应用前景。它是以蔗糖为原料，经过适当基因保护，使蔗糖分子中的葡萄糖结构上的某些羟基进行酯化，然后用氯化剂进行氯化，用氯元素选择性地取代蔗糖分子中4，1’，6’位一个羟基后，脱掉酰基，经提纯而得。按美国药典和我国药典要求，其纯度应大于98％。显然，必需要对反应产物进行有效的纯化，才能制得食品级制品。美国专利USP4980483中揭示将合成中间产物进行多次重结晶，得到6-酰基化三氯蔗糖纯品，再将其水解脱去酰基得三氯蔗糖纯品。该方法要求初始原料6-酰基蔗糖有较高纯度，氯化反应条件应严格控制，才能进行重结晶，得到晶体经多次重结晶也难达到纯度大于98％要求。在美国专利USP5298611中揭示，先将6-酰基化蔗糖进行氯化反应后的混合物中分离出6-酰基-4，1’6’一氯-4，1’，6’三脱氧半乳型蔗糖粗品，再将其进行多酰基化反应制得4，1’，6’三氯-4，1’，6’三氯-4，1’，6’三脱氧半乳型蔗糖五酰基酯，将此五酰基酯进行多次重结晶纯化得到其纯品，将此纯品进行脱酰基反应生成4，1’，6’三氯-4，1’，6’三脱氧半乳型蔗糖纯品，达到药典指标。这种方法主要缺点是增加了多酰基化工序、重结晶工序，使生产过程复杂化，极大地增加了生产成本。在美国专利USP5977349中揭示了用硅胶作固定相的正相色谱法，或以苯乙烯-二乙烯基苯磺酸型树脂为固定相的体积排阻色谱法从蔗糖氯化反应后产物中分离三氯蔗糖的方法。硅胶固定相正相色谱法的主要不足是硅胶固定相通常只能使用一次或数次，操作十分不便，而且不经济，洗脱剂费用较高回收困难，影响该工艺大规模使用。体积排阻色谱法用于大规模制备分离时，选择性较差，通常仅能获取不同分子量馏分，要达到4，1’，6’三氯-4，1’，6’三脱氧半乳型蔗糖与其同分异构体之同有效分离是困难的，不易达到制备高纯三氯蔗糖制品的目的。

发明内容

作为本发明的主题，本发明者发现了可用廉价的、高效率的、化学稳定性好、可以多次使用的高分子型反相色谱固定相，以反相色谱方法，经济而有效的从蔗糖氯化反应后产物混合物中分离和纯化4，1’，6’三氯-4，1’，6’三脱氧半乳型蔗糖，即商品三氯蔗糖；也可以用此反相色谱方法从合成工艺液中富集和纯化目标中间产物。

本发明的方法包括；

1、将蔗糖氯化反应后产物混合物、或含有合成蔗糖的目标中间体产物的反应物混合物，分别溶于可浑发的有机溶剂中，加入多孔型高分子聚合物填料，或硅藻土，蒸发除去有机溶剂，得到固定有样品的固相试样。也可以将蔗糖氯化反应后产物混合物，或含有合成蔗糖的目标中间产物的反应混合物，溶于适当的有机溶剂水溶液中，制成液相上样液。

2、将制得的一种固相试样置于填充有高子型的反相色谱固定相的色谱柱顶端，完成进样步骤，或将制成的一种液相上样液，注入填充有高分子型反相色谱固定相的色谱柱内，完成进样步骤，再分步地用不同浓度的含有适当的有机溶剂的水溶液对色谱柱进行洗脱，即进行反相色谱法分离。混合物试样中的各组分将顺次从色谱柱出口馏出。对于蔗糖氯化反应物混合物的流出次序是：无机物＜二氯代蔗糖化合物＜4，1’，6’三氯-4，1’，6’三脱氧半乳型蔗糖＜三氯代蔗糖同分异构体＜四氯代蔗糖＜有色有机杂质，分步收集馏出物，将纯4，1’，6’三氯-4，1’，6’三脱氧半乳型蔗糖馏分收集，进行减压蒸馏除去溶剂，残留物直接干燥或进行重结晶后，干燥晶体，得到4，1’，6’三氯-4，1’，6’三脱氧半乳型蔗糖纯品。对于分离合成三氯蔗糖目标中间产物试样的分离，只需收集目标中间产物馏分后，真空浓缩干燥制成目标中间产物即可。