[发明专利]一种用于快速鉴定蛋白质及其N端序列的新方法和试剂盒

权利要求书

1.一种用于快速测定蛋白质N端序列的方法，该方法包括：

(1)对蛋白质的氨基进行化学修饰

(2)用还原剂打开蛋白质分子中的二硫键，破坏其高级结构；用烷基化试剂封闭巯基，防止其重新形成二硫键；

(3)用化学消化或酶消化法对蛋白质进行消化，产生适于质谱分析的肽段；

(4)用质谱分析技术分析蛋白质末端肽段，使其裂解产生碎片离子的质谱图；

其特征在于所述步骤(1)的处理方法为：

(a)用酸酐类或活化羧酸酯类同系物试剂对蛋白质的末端氨基进行化学修饰，使其带上同系物标记；

(b)用一种或多种含游离氨基的化学试剂，对蛋白质的修饰反应进行终止。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(a)所述同系物试剂对选自乙酸酐/丙酸酐，丁二酸酐/戊二酸酐，乙酸琥珀酰亚胺酯/丙酸琥珀酰亚胺酯，或苯甲酸琥珀酰亚胺酯/甲基苯甲酸琥珀酰亚胺酯。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(b)所述化学试剂选自三羟乙基氨基甲烷或赖氨酸。

4.一种用于快速测定蛋白质N端序列的试剂盒，其特征在于该试剂盒含有：

(a)一对或多对可对蛋白质N端氨基进行修饰，使其带上质量标记的同系物试剂对；

(b)一种或多种含游离氨基的化学试剂；

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于(a)所述同系物试剂对选自乙酸酐/丙酸酐，丁二酸酐/戊二酸酐，乙酸琥珀酰亚胺酯/丙酸琥珀酰亚胺酯，或苯甲酸琥珀酰亚胺酯/甲基苯甲酸琥珀酰亚胺酯。

6.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于(b)所述化学试剂选自三羟乙基氨基甲烷或赖氨酸。