[发明专利]一种重组人生长激素(rhGH)高效表达方法无效
申请号: | 200610030882.1 | 申请日: | 2006-09-06 |
公开(公告)号: | CN101139583A | 公开(公告)日: | 2008-03-12 |
发明(设计)人: | 黄阳滨;孙九如;张翊;任军;刘勇 | 申请(专利权)人: | 上海新生源生物医药有限公司 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12P21/02;C12N1/19;C12N15/18 |
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地址: | 200233上海市浦东*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 重组 人生 激素 rhgh 高效 表达 方法 | ||
1.一种新型重组人生长激素的生产方法,其特征在于,该方法包括步骤:
a)在适合的表达条件下,在摇瓶中培养宿主细胞,从而分泌表达出新型重组人生长激素;
b)在适合的表达条件下,在5L发酵罐中优化出最佳中试生产方案。
2.如权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,它是毕赤酵母。
3.如权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,它含有编码生长激素蛋白(r-hGH)的核苷酸序列。
4.如权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,其含有的编码生长激素蛋白(r-hGH)的核苷酸序列,氨基酸序列为A-B,本发明去掉了A区信号肽序列。其中,
A为r-hGH第1-26位信号肽氨基酸;
B为r-hGH第27-217位为非糖基化氨基酸。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(a)所示的表达条件为:较佳培养基为3号条件培养基即低盐培养基,诱导温度为25-37℃,较佳的为30℃;诱导pH为3-7,较佳的pH为3-4。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(b)所示的表达条件为:较佳补料为Yeast extract,诱导温度为25-37℃,较佳的为30℃;诱导pH为3.0-4.5,较佳的为3.0。
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