[发明专利]葡激酶肌肉注射剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，尤其涉及溶栓药物肌肉注射剂及其制备方法。

背景技术

目前用于溶栓的药物主要有尿激酶(uk)，链激酶(sk)和组织型血纤溶酶原激活剂(t-PA)。其使用于溶栓的治疗，都是采用静脉滴注或推注，或推注与滴注相结合。也有直接注入血管的栓体周边等方法，使血药浓度短时间内达到高峰。对急性血栓如心肌梗死治疗可及时发挥作用，抢得宝贵的时间，得到治疗效果。但对慢性的动静脉血栓治疗，由于长时间滴注不方便而不适用。

溶栓新药葡激酶(Staphylokinase，Sak)具有纤维蛋白特异性，在临床上，使用推注与滴注结合，将其用于急性心肌梗死血栓病人，再通率可达到80％。文献报道，Steen Vandersdueren等用r-sak治疗周身动脉血栓，血管内先推注1mg或2mg，随后以每小时0.5或1.0mg滴注给药8个多小时，再通率达67.5％。但上述治疗方法烦琐、过程长，而且不适于需较长时间给药的病人。目前，市售的r-sak为冷冻干燥针剤，用于治疗急性心肌梗死血栓病人时，滴注给药30钟分完成；用于动静脉血栓治疗时，需滴注给药8个多小时。

Sak是异体蛋白，用于人体有较强的免疫原性。大多数病人给药两周后出现中和抗体，并且抗体水平逐渐上升，可以维持数月之久，从而阻碍了Sak的反复使用(Declerck PJ et al.Thromb Haemost.71.129-133(1994))。

因此，本领域迫切需要提供一种免疫原性低的重组葡激酶及其新剂型，它使用方便，适于需长时间给药的病人，从而能避开长时间滴注的烦琐过程，并能提供更有效的预防治疗。

发明内容

本发明的目的是提供一种葡激酶的新剂型及其制备方法和用途。

本发明的另一个目的是提供一种免疫原性低的重组葡激酶。

在本发明的第一方面，提供了一种葡激酶肌肉注射剂，它含有：

(a)0.5-40mg/ml葡激酶；

(b)药学上可接受的溶剂或辅料。

在另一优选例中，所述的葡激酶肌肉注射剂含有：1-10mg/ml葡激酶。

在另一优选例中，所述的注射剂还含有5-12mM磷酸盐，较佳地含有3-15mM磷酸盐。

在另一优选例中，上述注射剂的规格为1ml、2ml、或4ml。

在另一优选例中，所述的注射剂的pH为6.5-7.5。

在另一优选例中，所述的注射剂是固体形式，它含有0.5-400mg葡激酶和3-150mmol磷酸盐，在加入肌肉注射用溶剂后，会复溶形成含有(a)0.5-40mg/ml葡激酶；(b)3-15mM磷酸盐的溶液剂型。

在另一优选例中，上述葡激酶肌肉注射剂中所含的葡激酶是天然葡激酶或重组葡激酶。

在另一优选例中，上述葡激酶肌肉注射剂中所含的葡激酶是低抗原性重组葡激酶或其PEG化衍生物。

在另一优选例中，上述的葡激酶肌肉注射剂中所含的葡激酶是缺失了野生型葡激酶N端的17-22个氨基酸。

在另一优选例中，上述的葡激酶肌肉注射剂中所含的葡激酶与野生型葡激酶相比，其免疫原性为野生型葡激酶的10％或更低，所述的免疫原性的测定方法为：将一定量活性相当的野生型葡激酶，和低抗原变体葡激酶与不同量野生型葡激酶的抗体在体外作中和试验，中和后计算残存量。

在另一优选例中，上述的葡激酶肌肉注射剂中所含的低抗原性重组葡激酶的核酸序列为SEQ ID NO：1，SEQID NO：2或SEQ ID NO：3，其相应的氨基酸序列为SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：6。

在另一优选例中，所述的低抗原性重组葡激酶的核酸序列为SEQ ID NO：2，其相应的氨基酸序列为SEQ ID NO：5。

在另一优选例中，所述的低抗原性重组葡激酶的分子量为5,000-25,000道尔顿。

在本发明的第二方面，提供了一种上述的葡激酶肌肉注射剂的制备方法，它包括步骤：

(i)将葡激酶溶于药学上可接受的注射用溶剂中，形成含0.5-40mg/ml葡激酶的葡激酶肌肉注射溶液；

(ii)将上述的注射溶液分装于容器中，形成葡激酶肌肉注射剂。

在另一优选例中，在步骤(i)和(ii)之间还包括步骤：调节pH为6.5-7.5和进行除菌处理。