[发明专利]离体粉状孢子永久玻片标本制作方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种标本制作方法，具体的说是涉及一种离体粉状孢子永久玻片标本制作方法。

背景技术

植物病原菌玻片标本是植物病理学实验教学中重要的实验材料。植物病原菌玻片标本分永久玻片标本和半永久玻片标本等。永久玻片标本可以永久保存，永久使用。半永久玻片标本保存期短，使用年限3年左右。关于永久玻片标本的制作方法，在专著(植病研究方法)及教科书(实验指导书)中只介绍了和寄主组织在一起的病原菌结构，如：带有寄主组织的子囊壳、分生孢子器、分生孢子盘等的永久玻片标本制作方法，而对于离体的粉状孢子类如何将其制作成永久玻片标本未见有介绍，其它科技文献中也未见有报道。因此长期以来，对离体的粉状孢子类，如：黑粉菌、红粉菌等，只能将其制作成半永久玻片标本，由于保存使用期短，需要不断地投入人力、物力和时间来制作这类病原菌玻片。因此，如何将离体的粉状孢子制作成永久玻片标本，是植物病原菌制片技术的一个空白点。

发明内容

本发明的目的就在于提供一种保存期长的离体粉状孢子永久玻片标本制作方法。

本发明的目的可通过以下措施来实现：

本发明主要采用以下方法步骤：

(1)、用吸管将浓度50-100％酒精加入到离心管中，加入量以能够淹埋孢子为准，用挑针将离体粉状孢子挑到离心管中的酒精里，充分搅拌，放置6-24小时；

(2)、将离心管放入离心机，500-2000转/分钟，离心3-30分钟；

(3)、用吸管吸掉离心管里的酒精，加入50-100％酒精，放置6-24小时；

(4)、用吸管吸掉离心管里的酒精，加入二甲苯，放置6-24小时；

(5)、按重量份将30份-80份二甲苯及70份-20份树脂胶的混合液加入到离心管中，充分搅拌均匀，使之成为孢子悬浮液；

(6)、用玻璃棒蘸一滴孢子悬浮液滴到载玻片上，然后盖上盖玻片，即制成永久玻片标本。

本发明中步骤(3)中应重复两次。步骤(4)中应重复两次。

本发明填补了植物病原菌制片技术的一项空白，创造了离体粉状孢子类制作永久玻片的新方法。如果应用于科研，可使有价值的离体粉状孢子、植物花粉粒等的形态特征得以永久保存，如果应用于教学，可使教学玻片永久使用，节省大量人力、物力、和时间。

具体实施方式

本发明以下结合实施例作以详细的描述：

实施例1、

本发明主要采用以下方法步骤：

(1)、用吸管将浓度50％酒精加入到离心管中，加入量以能够淹埋孢子为准，用挑针将离体粉状孢子挑到离心管中的酒精里，充分搅拌，放置6小时；

(2)、将离心管放入离心机，500转/分钟，离心3分钟；

(3)、用吸管吸掉离心管里的酒精，加入50％酒精，放置6小时；

(4)、用吸管吸掉离心管里的酒精，加入二甲苯，放置6小时；

(5)、按重量份将30份二甲苯及70份树脂胶的混合液加入到离心管中，充分搅拌均匀，使之成为孢子悬浮液；

(6)、用玻璃棒蘸一滴孢子悬浮液滴到载玻片上，然后盖上盖玻片，即制成永久玻片标本。

本发明中步骤(3)中应重复两次。步骤(4)中应重复两次。

实施例2、

本发明主要采用以下方法步骤：

(1)、用吸管将浓度60％酒精加入到离心管中，加入量以能够淹埋孢子为准，用挑针将离体粉状孢子挑到离心管中的酒精里，充分搅拌，放置10小时；

(2)、将离心管放入离心机，800转/分钟，离心10分钟；

(3)、用吸管吸掉离心管里的酒精，加入60％酒精，放置10小时；

(4)、用吸管吸掉离心管里的酒精，加入二甲苯，放置10小时；

(5)、按重量份将40份二甲苯及60份树脂胶的混合液加入到离心管中，充分搅拌均匀，使之成为孢子悬浮液；

(6)、用玻璃棒蘸一滴孢子悬浮液滴到载玻片上，然后盖上盖玻片，即制成永久玻片标本。

本发明中步骤(3)中应重复两次。步骤(4)中应重复两次。

实施例3、

本发明主要采用以下方法步骤：

(1)、用吸管将浓度70％酒精加入到离心管中，加入量以能够淹埋孢子为准，用挑针将离体粉状孢子挑到离心管中的酒精里，充分搅拌，放置12小时；

(2)、将离心管放入离心机，1200转/分钟，离心15分钟；

(3)、用吸管吸掉离心管里的酒精，加入75％酒精，放置12小时；

(4)、用吸管吸掉离心管里的酒精，加入二甲苯，放置12小时；