[发明专利]雪胆甲素的制备方法和在制备治疗癌症的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种药用成份雪胆甲素的制备方法，以及在制备治疗癌症的药物中的新应用。

背景技术

雪胆素为一种混合物，由雪胆甲素和雪胆乙素组成。最早由陈维新等人从园果雪胆植物(Hemsleya amalils Diels)的根部分离得到(化学学报，1975，33(1)，5)，雪胆甲素鉴定为19—失碳--9β-甲基-10-3-氢-2β，3，16，20，25-五羟基Δ5羊毛甾烯-11，20-双酮-25-乙酸酯(IIa)即葫芦素F(Ic)的23.24-cc双氢-25-乙酸酯，乙素鉴定为葫芦素F(Ic)的23，24-双氢化合物，为二种新的化合物，并研制雪胆素片剂，于1974年已收载于云南省药品药品标准，用于治疗菌痢肠炎、气管炎、急性扁桃腺炎。

为了寻找提取雪胆素的植物资源，一些学者先后对本属植物进行了资源化学的研究，先后从罗锅底(Hemsleya maerosperma c.y.wu)，长果雪胆(H，dolichocarp W.J.cheng)峨眉雪胆(H，emiensil L.T.Sent)分离出雪胆甲素，乙素，其提取方法与陈氏的提取方法类同，均用乙醇提取生药，提取浸膏在水中用醋酸乙酯提取，提出物上硅胶柱，用氯仿：丙酮：醋酸乙酯三种不同比例的混合溶剂洗脱，洗脱液回收得粗品，再用乙醇重结晶，可分别得到甲素、乙素(参考文献：Rui-Lin-Nie etal.planta Medica 1984:322:施亚琴等云南动植物研究。1990。12(4)，460；中草药1995，26(12)，619)。

中国专利申请CN01102620.0公开了一种“纳米雪胆素制剂药物及其制备方法”，是以纳米雪胆素为原料，按比例配制，制成新的药物制剂，其颗粒细度达1200—1500目，粒径为0.1—200nm，其中绝大部分粒径小于100nm，并具有新的物性。采用微波萃取、减压浓缩、超音速射流技术喷雾干燥等步骤制成。中国专利申请CN03159197.3公开了一种“雪胆素滴丸及其制备方法”，其特征在于：将1重量份经超微粉碎的雪胆素细粉加入至1～10重量份熔融的基质中，充分混匀，滴制法在冷却剂中冷凝成丸，除冷却剂，干燥，即得。中国专利申请CN02134164.8公开了一种“雪胆素类衍生物及其制备方法和作为抗菌剂的应用”，提供一种与现有技术不同的雪胆素衍生物，其制备方法，以该化合物为有效成分的抗菌剂。

目前，尚未发现雪胆甲素在抗癌的药物中应用的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种雪胆甲素的制备方法。

本发明的另一目的是提供雪胆甲素在制备治疗癌症的药物中的应用。

本发明所述的雪胆甲素的制备方法由以下步骤组成：

一、取雪胆属植物块根，粉碎，用18—26重量倍的丙酮为溶剂，采用渗漉法提取，提取液在60—75℃水浴锅中回收，即得浸膏；

二、将提出的浸膏拌入1—2重量倍的硅胶，烘干，上硅胶柱，用氯仿:甲醇进行梯度洗脱，其中甲醇体积浓度为2-10％，回收洗脱液，得粗品；

三、用甲醇或乙醇对粗品在水浴中加热溶解，滤过，置室温，重结晶，得凌柱状结晶，即纯度为98％以上的雪胆甲素。

步骤一中所述的雪胆属植物为罗锅底、长果雪胆、峨眉雪胆等。步骤二中先用纯氯仿洗脱杂质，再用氯仿:甲醇梯度洗脱；步骤三中所得雪胆甲素经高效液相(HPLC)分析纯度在98％以上，熔点226-228℃，经紫外光谱、红外光谱、核磁共振、质谱四谱分析，确认为雪胆甲素。其结构式为：

本发明涉及雪胆甲素在制备治疗肝癌的药物中的应用。

本发明涉及雪胆甲素在制备治疗肺癌的药物中的应用。

本发明涉及雪胆甲素在制备治疗胃癌的药物中的应用。

本发明涉及雪胆甲素在制备治疗喉癌的药物中的应用。

本发明涉及雪胆甲素在制备治疗白血病的药物中的应用。

药效学试验资料：

雪胆甲素单体成份经药理体内外抗癌试验，确认本品体外对人体实体癌细胞具有抑制或杀灭作用，对人体肺癌细胞A549生长的Ic50(μg/ml)为1.50，与顺铂的Ic50 1.60基本相同，小鼠体内抗癌试验与制剂类型，及给药途径相关，相比之下，口服给药比注射给药稍差，其乳剂静脉注射对肺癌抑制率最高可达59％。

抗癌试验：

1、体外筛选试验，采用抗癌物质活性的改良MTT法进行。

癌细胞株：

HL60       人白血病细胞株

A549       人肺癌细胞株