[发明专利]使用成骨细胞与生物基质的混合物的成骨用组成物及其制造方法

权利要求书

1.一种使用成骨细胞和生物基质混合物制备成骨组成物的方法，其特征在于，包括：

从骨组织中分离成骨细胞及其前体细胞，在DMEM(Dulbecco’s ModifiedEagle’s Medium)  或者α-MEM (Minimum Essential Medium，AlphaModification)中培养/增生分离的成骨细胞及其前体细胞，制备成骨细胞悬浮液；

及将获得的成骨细胞悬浮液与生物基质混合制备成骨细胞治疗剂。

2.根据权利要求1所述，其特征在于，治疗剂的制备步骤进一步包括：将成骨细胞混合溶液与凝血剂混合，所述成骨细胞悬浮液中混有生物基质。

3.根据权利要求2所述，其特征在于，混合步骤包括：

成骨细胞混合溶液与10至100IU/mL的作为凝血剂的凝血酶混合；

含有凝血酶的混合溶液与20至100mg/mL的作为凝血剂的血纤蛋白原混合。

4.根据权利要求1所述，其特征在于，生物基质是胶原蛋白、羟磷灰石或者其混合物。

5.根据权利要求4所述，其特征在于，胶原蛋白向成骨细胞悬浮液中的加量为67μg/mL至20mg/mL，羟磷灰石向成骨细胞悬浮液中的加量为30μg/mL至3.4mg/mL。

6.根据权利要求4所述，其特征在于，胶原蛋白与成骨细胞悬浮液混合前用中和溶液中和至中性pH值。

7.根据权利要求3所述，其特征在于，

在向骨细胞与生物基质的混合溶液中加入前，冻干凝血酶要先溶解于液体DMEM或者α-MEM中，磷酸盐离子(PO₄^3-)作为骨矿物质成分加入，在培养基质中磷酸盐离子(PO₄^3-)的加量是凝血酶的两倍；及

在向获得的成骨细胞混合溶液中加入前，冻干血纤蛋白要先溶解于液体DMEM或者α-MEM中，钙离子(Ca²⁺)作为骨矿物质成分加入，在培养基质中钙离子(Ca²⁺)的加量是血纤蛋白的两倍。

8.一种用权利要求1所述方法制备的使用成骨细胞和生物基质混合物制成的成骨组成物。