[发明专利]检测非人血清中的人抗体

权利要求书

1.一种检测含有非人物种流体的样品中人的、人嵌合的、人源化的抗体或其包含恒定区的片段的方法，包括如下步骤：

(1)将捕捉剂施于测定表面；

(2)用含有非人哺乳动物球蛋白的封闭缓冲液封闭捕捉剂的非特异性结合位点；

(3)使封闭后的捕捉剂与样品反应以捕捉存在于样品中的抗体；并

(4)用包含可检测信号的检测剂检测捕捉到的抗体。

2.权利要求1的方法，进一步包括如下步骤：

用相同的或亲缘关系密切的非人物种的非人体液预吸收捕捉剂。

3.权利要求1的方法，其中所述检测剂和所述捕捉剂包含相同的抗体结合部分。

4.权利要求3的方法，其中所述检测剂和所述捕捉剂各自包括结合人的、人嵌合的或人源化的抗体的抗体。

5.权利要求4的方法，其中所述检测剂抗体包括捕捉剂抗体。

6.权利要求1的方法，其中所述检测剂包括偶联有可检测标记物的抗体。

7.权利要求6的方法，其中所述标记物包括碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶。

8.权利要求1的方法，其中所述样品包括非人灵长类动物血清。

9.权利要求8的方法，其中所述捕捉剂用相同的或亲缘关系密切的非人灵长类动物物种的非人灵长类动物血清预吸收。

10.权利要求1的方法，其中所述封闭缓冲液含有牛丙种球蛋白。

11.权利要求1的方法，其中所述封闭缓冲液含有小鼠IgG。

12.权利要求1的方法，其中所述封闭缓冲液含有至少一种兔IgG或驴IgG。

13.权利要求1的方法，其中所述检测剂处于含有非人哺乳动物球蛋白的缓冲液中。

14.权利要求1的方法，其中所述样品处于样品缓冲液中且所述检测剂处于检测缓冲液中，而且其中所述样品缓冲液、所述检测缓冲液或两者不含有非人哺乳动物球蛋白。

15.权利要求1的方法，其中所述人的、嵌合的、人源化的抗体或其片段包括嵌合抗体。

16.权利要求1的方法，其中所述人的、嵌合的、人源化的抗体或其片段包括F(ab)₂片段。

17.权利要求1的方法，其中所述人的、嵌合的、人源化的抗体或其片段包括人源化抗体。

18.权利要求15的方法，其中所述抗体包括人源化的抗HER2抗体。

19.权利要求15的方法，其中所述抗体包括人源化的抗CD20抗体。

20.权利要求15的方法，其中所述抗体包括人源化的抗VEGF抗体。

21.一种检测含有非人体液的样品中人的、人嵌合的、人源化的抗体或其包含恒定区的片段的方法，包括如下步骤：

(1)用相同的或亲缘关系密切的非人物种的非人体液预吸收包含非人抗体的捕捉剂；

(2)用含有非人哺乳动物球蛋白的封闭缓冲液封闭捕捉剂的非特异性结合位点；

(3)使封闭后的捕捉剂与样品反应以捕捉存在于样品中的抗体；并

(4)用与捕捉剂包含相同非人抗体的检测剂检测捕捉到的抗体；

其中所述捕捉剂处于捕捉缓冲液中且所述样品处于样品缓冲液中，而且其中所述捕捉缓冲液、所述样品缓冲液或两者不含有非人哺乳动物球蛋白。

22.权利要求21的方法，其中所述捕捉剂包被在测定表面上。

23.权利要求22的方法，其中所述测定表面包括聚合物基质、传感器芯片、树脂珠或微量滴定板。

24.权利要求21的方法，其中所述非人哺乳动物球蛋白是牛丙种球蛋白。

25.权利要求1的方法，其中所述检测包括对样品中抗体的量进行定量。

26.权利要求21的方法，其中所述检测包括对样品中抗体的量进行定量。