[发明专利]畜水产品中残留动物用药物的提取液

说明书

技术领域

本发明涉及残留动物用药物的提取液。更详细地说，涉及测定畜水产品中残留的动物用药物时所使用的提取液。

背景技术

近年来，为了预防/治疗畜水产动物的疾病或促进生长，人们使用了许多种动物用药物。测定畜水产品中动物用药物的残留量(定量)对确保食品安全至关重要。基于此种状况，日本及国外各国导入了与畜水产品中残留的动物用药物相关的肯定列表制度，同时规定了200多种动物用药物残留量的暂定基准值，但实际上用公定方法对每种动物用药物的残留进行分析，时间与劳动力均难以应付。因此希望开发出一种能同时对多成分且简便、迅速分析的残留物质的分析方法。

在动物用药物中，特别是抗菌物质(例如抗生素、合成抗菌药等)在目前集约化饲养方式下使用的种类和用量均有增加的趋势，其在畜水产品中残留的可能性倍受关注。

但现在的问题是，即使对在食品卫生法中规定的动物用药物中，诸如螺旋霉素、替米考星、庆大霉素、大观霉素、新霉素等抗生素类或喹喔啉甲酸、环丙马秦等高极性化合物也未能开发出多成分同步分析的方法。进行所述多成分同步分析，需要从被检物畜水产品中一次性提取出多种残留动物用药物。对可溶于有机溶剂的动物用药物来讲，通过使用有机溶剂作为提取液，上述问题已得到解决(例如，参考Howells，L.，Sauer，M.J.，Analyst，126，155～160，2001)。但是，对难溶于有机溶剂的药物来讲，因不能使用有机溶剂，提取工序存在问题。

如上所述，对可溶于有机溶剂的动物用药物来讲，使用有机溶剂作为提取液，问题已得到解决，也期望对水溶性的动物用药物能同时提取的一次性提取液。但问题是在动物用药物中，如抗菌物质等各种药物可稳定存在的条件各异，要在多种残留的动物用药物不变性的条件下高效一次性提取是困难的。

为解决上述问题，本发明人等进行了各种研究，结果发现通过使用具有特定性质的提取液，可以在多种残留动物用药物不变性的条件下，高效一次性提取。本发明根据这一发现而设，提供对畜水产品中残留的动物用药物、特别是抗菌物质一次性提取有用的提取液。

发明内容

为解决上述问题所做的本发明是一种畜水产品中残留动物用药物的提取液，其包括含0.05～1％(W/V，以下同样)的偏磷酸、pH为5.5～7.5的缓冲液。该提取液特别适合用于残留动物用药物为抗菌物质时的提取，缓冲液优选使用McIlvaine缓冲液。

实施发明的最佳方式

如上所述，动物用药物中特别是抗菌物质，各种物质稳定存在的条件不同，导致难以一次性提取。基于上述观点，本申请发明人等为消除这一障碍，进行了如下试验。

首先，根据提取液的极性，将目标物质分成了两类。目标物质之一选择的是可溶于有机溶剂的四环素等21种化合物；目标物质之二选择的是高极性且难溶于有机溶剂的氨基糖苷类抗生素的4种化合物(链霉素、双氢链霉素、大观霉素和庆大霉素)。

首先，进行的是添加回收试验，即在牛肉中加入规定量的目标物质，以此作为被检物，对其利用pH7.0的McIlvaine缓冲液/EDTA/甲醇混合溶剂进行提取，再使用C₁₈固相提取柱进行纯化。

对目标物质之一的21种化合物进行了20ppb浓度的添加回收试验，结果回收率以及变动系数基本达到了法定药典的基准。

与此不同，对目标物质之二的氨基糖苷类抗生素，为使这些化合物能吸附于C₁₈固相提取柱，提取液中添加了离子对试剂七氟丁酸，然后通过C₁₈固相提取柱进行了纯化。通过这样的操作预计回收链霉素、双氢链霉素、大观霉素和庆大霉素，可实际上未能回收到庆大霉素。

为了查找到原因，在C₁₈固相提取柱处理前，向提取液中添加标准物质，结果论及的所有氨基糖苷类抗生素得到回收。因此判断问题出现在C₁₈固相提取柱纯化前的工序，即提取。

在此试验庆大霉素提取法，用公定方法规定的提取条件即在提取液中使用1％的偏磷酸(pH2)，研究的结果确认可以回收庆大霉素。以往使用上述1％偏磷酸(pH2)目的在于除去蛋白质，提取溶剂因添加偏磷酸呈现了酸性。

但是，如果采用此类提取溶剂，则红霉素等酸性条件下不稳定的化合物就会被分解掉。因此，多种成分同步分析法不能使用低pH的提取液。此外，考虑有氯四环素等在碱性条件下不稳定的化合物存在，因此多种成分同步测定需要在中性条件下提取。为此，就接近中性条件下的提取方法进行了研讨。