[发明专利]耐受胁迫的棉花植物

权利要求书

1.产生耐受胁迫的棉花植物的方法，其包括以下步骤：

a)将嵌合基因导入棉花细胞以产生转基因棉花细胞，所述嵌合基因包 含下列有效连接的DNA片段：

i)植物可表达的启动子；

ii)可转录的DNA区域，其包含

(1)包含SEQ ID No：14的核苷酸3192-3617的第一DNA区域；

(2)包含SEQ ID No：14的核苷酸4424-4851的第二DNA区域；其中 所述第一DNA区域和所述第二DNA区域处于彼此反向重复的方向并且其 中转录自所述可转录区域的RNA分子能够在转录自所述第一DNA区域的 RNA区域与转录自所述第二DNA区域的RNA区域间形成双链RNA区域； 和

iii)包含在植物中有功能的转录终止和聚腺苷酸化信号的DNA区域；

b)再生所述转基因棉花细胞以得到转基因棉花植物；以及

c)鉴定比未转化的棉花植物更抵抗非生物性胁迫条件的转基因棉花 植物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述可转录的DNA区域还包含 在所述第一DNA区域和所述第二DNA区域之间的内含子序列，所述内含 子序列将所述第一DNA区域和所述第二DNA区域分开。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述内含子由SEQ ID No：14的 核苷酸3649-4423组成。

4.根据权利要求1至3中任意一项所述的方法，其中所述植物可表达 的启动子由SEQ ID No：14的核苷酸2686-3191组成。

5.根据权利要求1至3中任意一项所述的方法，其中包含转录终止和 聚腺苷酸化信号的所述DNA区域由SEQ ID No：14的核苷酸4852-5591 组成。

6.根据权利要求1至3中任意一项所述的方法，其中比未转化的棉花 植物更抵抗非生物性胁迫条件的所述转基因棉花植物使用纤维组织培养物 测定法进行鉴定。

7.根据权利要求1至3中任意一项所述的方法，其中比未转化的棉花 植物更抵抗非生物性胁迫条件的所述转基因棉花植物使用冷萌发测定法进 行鉴定。

8.根据权利要求1至3中任意一项所述的方法，其中比未转化的棉花 植物更抵抗非生物性胁迫条件的所述转基因棉花植物通过测定任一活性氧 类、NAD或ATP的浓度进行鉴定。

9.根据权利要求1至3中任意一项所述的方法，其还包括将所述抗胁 迫棉花植物与另一种棉花植物杂交以得到抵抗胁迫的棉花子代植物的步 骤。

10.鉴定通过权利要求1至5中任意一项所述的方法所获得的抵抗胁 迫的棉花植物的方法，所述棉花植物包含权利要求1至5中任意一项所述 的嵌合基因，所述鉴定方法包括以下步骤：

a)自所述棉花植物起始纤维组织培养物；

b)使所述的纤维组织培养物受到胁迫条件作用，和

c)将所述培养物中的纤维起始或延伸与自对照植物起始并受到所 述胁迫条件作用的培养物中的纤维起始或延伸进行比较。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述的胁迫条件包含使所述的 纤维组织培养物受到升高的温度作用选择的时间期间。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述升高的温度选自45℃至 50℃范围，并且所述时间期间选自2小时至4小时范围。