[发明专利]角质形成细胞生长因子的治疗制剂

说明书

发明领域

本发明涉及冻干的角质形成细胞生长因子的制剂和生产包含角质 形成细胞生长因子的冻干的组合物的方法。

发明背景

角质形成细胞生长因子(KGF)是在人类胚胎的肺成纤维细胞系 的条件培养基中首先鉴定的上皮细胞特异的生长因子[Rubin et al.， Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86：802-806(1989)]。KGF的信使RNA的表 达已经在几种来自各种发育阶段的上皮组织的基质成纤维细胞系中检 测到。在从正常的成年人肾脏和胃肠道的器官提取的RNA中，KGF 的转录产物也是明显的[Finch et al.，Science245：752-755(1989)]。 KGF从培养的成纤维细胞分泌并且在真皮中而不是表皮中体内表达的 证据表明，KGF可能是角质形成细胞增殖的重要的正常旁泌性效应 物。研究显示，在刺激组织培养物中原发或继发性人类角质形成细胞 的增殖方面，KGF与表皮生长因子(EGF)一样有效[Marchese et al.，J. Cell.Phys.144：326-332(1990)]。KGF是由许多器官的上皮细胞附近 的间充质细胞产生的，这些器官包括表皮、口腔、低位胃肠上皮细胞、 胰腺、肝脏、肺、尿道上皮、前列腺上皮细胞等[Finch et al，supra， Housley et al.，J Clin Invest.94：1764-77，(1994)；Yi et al.，Am J Path. 145：80-85，(1994)；Pierce et al.，J Exp.Med.179831-40，(1994)；Yi et al，J Urol.154：1566-70，(1995)；和Ulich et al.，J Clin Invest.93：1298- 1306，(1994)]。

在国际专利公开WO90/08771中描述了从人类胚胎成纤维细胞系 的条件培养基纯化KGF，以及纯化的KGF的部分氨基酸测序，KGF 基因的克隆和在细菌细胞中表达基因来产生生物学活性的重组KGF。 这个出版物还公开了KGF或KGF样多肽作为烧伤的伤口愈合试剂或 刺激移植的角膜组织。

在正常的成年动物中的体外和体内研究显示，KGF-1(以下 “KGF”)产生了毛囊形态发生、肝细胞增殖和在肺、乳腺、胰腺、 胃、小肠和大肠中的上皮细胞增殖方面的改变[Panos et al.，J.4Clin. Invest.92：969-977(1993)；Ulich et al.，Am.J.Path.144：862-868 (1994)；Yi et al.，Am.J.Path.145：80-85(1994)；和Ulich et al.，J.Clin. Invest.93：1298-1306(1994)]。KGF在胚胎或新生儿发育中的作用当前 正在研究中；然而，已经记录了KGF是新生小鼠中精囊发育的重要介 体[Alarid et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91：1074-1078(1994)]。此 外，在肝细胞中过量表达KGF的小鼠展现出多囊肾[Nguyen et al.， Oncogene 12：2109-19，(1996)]，而使用表面活性物启动子在肺中过量 表达KGF产生了具有肺部囊腺瘤的小鼠[Simonet et al.，Proc.Natl. Acad.Sci.USA 92：12461-65，(1995)]，表明KGF在正常的肾脏和肺部 发育中的重要性。

KGF已经显示了当将重组KGF局部施用到兔耳或猪皮肤中手术 诱导的伤口时提高了上皮重新形成和提高上皮细胞的厚度[Pierce et al.， J.Exp.Med.179：831-840(1994])；和Staiano-Coico et al.，J.Exp.Med. 178：865-878(1993)]。Bosch等[J.Clin.Invest.98：2683-2687(1996)] 报道了施用角质形成细胞生长因子将诱导肝细胞的增殖。

一般地，纯化的多肽仅在含水状态是勉强稳定的，并在加工和保 存期间经历引起生物学活性损失的化学和物理降解。此外，水溶液中 的多肽组合物经历水解作用，例如脱酰胺作用和肽键断裂。这些效果 对于意图在根据生物学活性定义的剂量范围内向人类施用的治疗活性 多肽是严重的难题。