[发明专利]HCV NS3－NS4A蛋白酶抑制

说明书

技术领域

本发明涉及抑制丝氨酸蛋白酶、特别是抑制丙型肝炎病毒NS3-NS4A蛋白酶活性的化合物。这些化合物通过干扰HCV生命周期发挥作用，并且是有用的抗病毒药。本发明进而涉及既可离体应用也可给予HCV感染病人的组合物。本发明也涉及给病人施用本发明组合物治疗HCV感染的方法。

背景技术

丙型肝炎病毒(“HCV”)感染是一个备受关注的人类医学问题。估计全球有3％的人血清流行，故HCV被认为是大多数非甲非乙型肝炎病例的致病因子[Alberti A等.丙型肝炎的自然史.J Hepatology.1999，31(Suppl.1)：17～24]。单单在美国约有4百万人可能被感染[Alter MJ等.美国病毒性肝炎的流行病学.Gastroenterol Clin North Am，1994，23：437～455；Alter MJ.美国的HCV感染.J Hepatology，1999，31(Suppl 1)：88～91]。

首次暴露于HCV，仅约20％感染者发展成临床急性肝炎，而其他人表现出感染自发消退。可是在几乎70％病例中HCV确立了能持续几十年的慢性感染[Iwarson S.慢性肝炎的自然病程.FEMS Microbiology Reviews，1994，14：201～204；Lavanchy D等.丙型肝炎的全球监督和管理.J Viral Hepatitis，1999，6：35～47]。这通常会造成复发和进行性恶化的肝脏炎症，常常会导致更严重的疾病状态如肝硬化和肝细胞癌[Kew MC.丙型肝炎和肝细胞癌.FEMS Microbiology Reviews，1994，14：211～220；Saito I等.HCV感染伴发肝细胞癌.Proc Natl Acad Sci USA，1990，87：6547～6549]。遗憾的是，对慢性HCV使人衰弱的进程尚无普遍有效的治疗方法。

HCV基因组编码一种3010～3033个氨基酸的多聚蛋白[Choo QL等.HCV的多样性与基因组成.Proc Natl Acad Sci USA，1991，88：2451～2455；Kato N等.日本非甲非乙型肝炎病人的人类HCV基因组的分子克隆.ProcNatl Acad Sci USA，1990，87：9524～9528；Takamizawa A等.从人携带者中分离得到HCV基因组的结构和组织.J Virol，1991，65：1105～1113]。推测这种HCV非结构性(NS)蛋白为病毒复制提供了必需的催化机制。NS蛋白由多聚蛋白的蛋白裂解而来[Bartenschlager R等.HCV的非结构性蛋白3编码切割NS3/4和NS4/5接头所需的丝氨酸型蛋白酶.J Virol，1993，67：3835～3844；Grakoui A等.HCV编码的丝氨酸蛋白酶的特征：蛋白酶依赖性多聚蛋白切割位点的测定.J Virol.1993，67：2832～2843；Grakoui A等.HCV多聚蛋白裂解产物的表达和鉴定.J Virol，1993，67：1385～1395；Tomei L等.NS3是HCV多聚蛋白加工所需的丝氨酸蛋白酶.J Virol，1993，67：4017～4026]。

HCV NS3包含丝氨酸蛋白酶活性，它可帮助加工处理大多数病毒酶，因此被认为对病毒复制和感染性是必需的。HCV NS3丝氨酸蛋白酶对病毒复制是必需的，因为催化三联体的取代导致在黑猩猩上感染性的丧失[Kolykhalov AA等.HCV编码的酶活性和3’非翻译区RNA保守元件是体内病毒复制所必需的.J Virol，2000，74：2046～2051]。已知NS3的头181个氨基酸(病毒多聚蛋白的1027～1207残基)含有NS3的丝氨酸蛋白酶区域，能加工处理HCV多聚蛋白所有4个下游位点[Lin C等.HCVNS3丝氨酸蛋白酶：反式裂解要求和加工动力学.J Virol，1994，68，8147～8157]。

HCV NS3丝氨酸蛋白酶及其相关辅助因子NS4A帮助加工病毒非结构性蛋白区成为包括所有病毒酶在内的各非结构性蛋白。这种加工类似于人免疫缺陷病毒天冬氨酰蛋白酶所进行的加工，此酶也涉及病毒蛋白的加工。抑制病毒蛋白加工的HIV蛋白酶抑制剂，对人是有效的抗病毒药，提示阻断病毒生命周期的这一阶段可导致具有治疗作用的活性药物产生。因此它是发现药物的有吸引力的靶标。