[发明专利]微生物数的测定方法及微生物数的测定装置

说明书

技术领域

本发明涉及计算微生物的个体数的方法。

背景技术

已经提出了各种计算微生物的个体数的方法。例如，在作为公定法而采用的方法中，存在如下的方法：在培养基中对细菌进行增菌培养，经过预定时间之后对群体(colony)进行计数而求出初始菌数。

但是，进行增菌培养直到能够目视辨认群体的程度需要近二十小时。因此，提出了对培养微生物的培养基中的溶解的氧浓度进行测定的方法。例如，通过测定流过氧电极的电流(以下称为“氧电流”)，从而测定培养基中的溶解的氧浓度。例如在专利文献1中公开了所述方法。但是，在专利文献1中示出的方法中，是对氧电流达到预定的阈值为止的时间进行计测。

[专利文献1]日本特开2003-235599号公报

发明内容

本发明的目的在于提供基于氧电流的能够更早地评价微生物的个体数的方法。

该发明的微生物的测定方法的第1方面是，在包含有以初始个数作为测定对象的微生物的培养基中，依次对根据氧量而流过的电流即氧电流(Inew)进行测定(S101、S112)，求出所述氧电流预定次数(Z2)超过第1阈值(IP)而降低所需的时间即第1测定时间(ts)，其中，所述微生物的测定方法具备下述步骤(a)～(c)。即：(a)根据预定的测定期间的所述氧电流的测定值，求出所述氧电流的每单位时间的差分即时间差分值(Knew)的步骤(SA)；(b)判定在所述步骤(a)中求出的所述时间差分值是否稳定的步骤(SB)；以及(c)当所述步骤(b)的判定为肯定时，设定所述第1阈值，使得所述第1阈值依赖于基于在最近的所述测定期间所测定的所述氧电流(I1～IZ+1)的值、且比该值低的步骤(S114a、S114b)。

该发明的微生物的测定方法的第2方面是，在微生物数的测定方法的第1方面中，在所述步骤(c)中，从最近所测定的所述氧电流(IZ+1)减去预定的阈值(Δ)来设定所述第1阈值(IP)。

该发明的微生物的测定方法的第3方面是，在微生物数的测定方法的第2方面中，在所述步骤(c)中，将最近所测定的所述氧电流(IZ+1)乘以大于0小于1的系数(q)来设定所述第1阈值(IP)。

在微生物的测定方法的第3方面中，优选将所述系数(q)设定为0.8。

该发明的微生物的测定方法的第4方面是，在包含有以初始个数作为测定对象的微生物的培养基中，依次对根据氧量而流过的电流即氧电流(Inew)进行测定(S101、S112)，求出所述氧电流的减小超过阈值(E3)而变得缓和的第1测定时间(tu)，其中，所述微生物的测定方法具备下述步骤(a)～(c)。即：(a)根据预定的测定期间的所述氧电流的测定值，求出所述氧电流的每单位时间的差分即时间差分值(Knew)的步骤(SA)；(b)判定在所述步骤(a)中求出的所述时间差分值是否稳定的步骤(SB)；以及(c)当所述步骤(b)的判定为肯定时，在之后所测定的所述差分值(Knew)相比步骤(b)的所述差分值(Kold)增大、且增量超过所述阈值的情况下，根据在最近所测定的所述测定期间来确定所述测定时间的步骤(SC)。

本发明的微生物的测定方法的第5方面是，在微生物数的测定方法的第1方面至第4方面中的任意一方中，在所述步骤(b)中，根据所述时间差分值的绝对值(|Knew|)在预定期间收敛于预定范围(E2)内(S108b、S109)，判定为所述时间差分值稳定。

本发明的微生物的测定方法的第6方面是，在微生物数的测定方法的第1方面至第5方面中的任意一方中，在所述步骤(b)中，根据所述时间差分值的相对于时间的变动(|Knew-Kold|/Δt)的绝对值在预定期间内收敛于预定范围(E1)内(S108a、S109)，判定为所述时间差分值稳定。

在微生物的测定方法的第6方面中，优选所述预定范围(E1)换算为电流密度时为0.6nA/mm²/min²，所述预定次数(Z2)是10次，所述预定期间是连续5次(Z1)进行所述氧电流的测定的长度。

本发明的微生物的测定方法的第7方面是，在微生物数的测定方法的第1方面至第6方面中的任意一方中，在所述步骤(b)中，在所述步骤(a)之后，经过了预定的停歇时间后，判定所述时间差分值是否稳定。

本发明的微生物的测定方法的第8方面是，在微生物数的测定方法的第7方面中，将所述停歇时间设定为200分钟。