[发明专利]动脉闭塞性疾病动物模型的构建

说明书

技术领域

本发明涉及动脉闭塞性疾病动物模型的构建方法、用于该方法的试剂盒(kit)或系统，以及通过该方法或该系统得到的动脉栓塞动物模型。尤其涉及以通过特定部位的结扎或者自体血凝块使动脉闭塞为特征的非人的动脉闭塞性疾病动物模型的构建方法、用于该方法的试剂盒或系统，以及通过该方法或该系统得到的动脉栓塞动物模型。

背景技术

以往，在循环系统或脏器移植等医学研究，或者循环系统疾病的药品开发中多使用心肌梗塞等心脏疾病模型。近年来，这些心脏疾病模型也开始用于再生医疗的研究中。

对于目前的心肌梗塞模型，例如作为心肌梗塞模型的构建方法，通常采用经开胸术的冠状动脉的结扎法，但是以往的结扎法中在刚处理后引起心室纤维性颤动，致死概率极高。因此，多采用使用缩窄环(ameroid ring)(通过体液的吸收，成为环状的cadein成分膨胀，在2周左右的时间缓慢闭塞血管的方法)的模型构建方法。该方法中存在的问题是闭塞程度出现离差，非梗塞例与不完全梗塞例均可出现，在稳定的病态模型方面有缺点。另外，还存在在较短时间内(例如，处理后1个月)的致死率高的问题。

因此，在循环系统和脏器移植等医学研究中，或者在循环系统疾病的药品开发中，以及在再生医疗的研究中，需要开发没有上述缺点的心肌梗塞模型。

动脉栓塞可导致各种疾病·障碍，但是仍不能说已经确定了对这些疾病·障碍的治疗方法。动脉栓塞导致的疾病·障碍的典型示例为心肌梗塞和脑卒中。脑卒中是在包括日本的发达国家中排名靠前的死亡原因，特别是在急性期的治疗法中期待有效的溶栓剂和神经保护剂等，但是这些药剂多在临床试验中以失败告终，显示出有效性的药剂非常少。同样的现状也存在于由动脉栓塞导致的其它疾病·障碍中。作为其原因之一，在以往的药剂开发中使用大鼠、小鼠等啮齿类动物，药效的“种间差异”很大。因此，希望在作为与人接近的动物的灵长类动物或中·大型哺乳动物中构建更接近于临床病态的病态模型，来进行评价。目前为止，已经使用猴子、猫、犬、猪等中·大型动物进行了一些缺血模型的构建，虽然它们作为方法显示了临床病态的侧面，但没有被认为是与实际临床相当的模型。特别是由于在急性脑缺血中对中脑动脉、颈内动脉、椎骨·脑底动脉等颅内动脉闭塞的病态(急性脑主动脉闭塞症)的预后差(死亡率10-15％)、多发病于中·轻年等，因此迫切希望有效且低合并症率的治疗战略，利用该病动物模型的基础研究成为要务。

以往的动脉闭塞动物模型，特别是脑主动脉闭塞动物模型的构建方法大致分为血管压迫法、血管内塞栓子法两种方法。前者通过开颅手术或者眼窝摘除术(参考非专利文献1等)等侵入式方法利用夹子或结扎等使目标主动脉闭塞，因此以闭塞中脑动脉水平部位的方法为代表。在中脑动脉闭塞模型中已经知道了一些中·大型动物的代表性缺血模型，但是大多数的障碍部位仅限于脑基底核，可以引起临床作为脑功能障碍的原因部位而最多出现问题的脑皮质的障碍的示例却很少。实际上，在这些动物模型的行为评价中，永久性麻痹的出现极少。另一方面，作为血管塞栓法，已知用塑料、硅酮、血凝块等闭塞血管的模型(参考非专利文献2以及3)，但是由于缺少确认准确注入至脑主动脉的方法以及评价缺血的方法，因此，在脑缺血部位的分布、病态方面存在离差，难以进行选择性且定量性的实验。

如上所述，在以往的血管塞栓法中存在以下缺点：血管塞栓的确实性以及塞栓形成后的缺血的确实性低，其程度也存在离差，缺乏定量性。而且还存在对动物的侵入性大、对动物的伤害大的缺点。如果可以获得克服这些缺点的动物模型，将促进对包括脑卒中的由动脉栓塞引起的疾病·障碍的研究，也将引起这些疾病·障碍的新的治疗方法的发现。另外，克服这些缺点的动物模型对于由动脉栓塞导致的疾病·障碍的治疗、预防用新药的开发以及再生医疗的研究非常有用。

非专利文献1：Hudgins WR等，Stroke.1970 Mar-Apr；1(20)：107-11

非专利文献2：Watanabe O等，Stroke 8：61-70，1975

非专利文献3：Kito G等，J Neurosci Methods.2001 Jan 30；105(1)：45-53

发明的揭示

本发明要解决的课题是开发一种可以得到闭塞程度的离差小、动物的致死率低、稳定病态的心肌梗塞模型的构建方法。其另一课题为开发一种血管栓塞形成以及之后的缺血的确实性高、其程度的离差小、可进行选择性且定量性的分析的血管栓塞动物模型的构建方法。另外，本发明的又一课题为开发一种对动物的侵入性小，对动物的伤害性小的血管栓塞动物模型构建方法。