[发明专利]肽的环化

权利要求书

1.通过内酰胺化作用环化肽的方法，所述方法包括以下步骤：

a.脱去肽的烯丙基型保护基团，所述肽在其Nα上用碱不稳定性保护基团保护，所述肽还包含至少一个烯丙氧基-羰基-保护的赖氨酸侧链或该赖氨酸侧链类似物的氨基官能团，并且还包含至少一个烯丙基-酯-保护的谷氨酰基或天冬氨酰基侧链或者该侧链类似物的ω-羧基，同时保留Nα上的碱不稳定性保护基团，其中所述烯丙型保护基是取代的或未取代的，

b.在弱碱试剂存在下通过所述去保护侧链的内酰胺化作用使肽环化，和

c.脱去所述肽Nα上的碱不稳定性保护基团。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述用碱不稳定性保护基团保护的Nα是还含有所述烯丙基-酯-保护的羧基的天冬氨酰基残基的Nα，优选所述天冬氨酰基残基是二肽序列Asp-His的一部分。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，还包括通过连续肽合成或去保护Nα的肽区段偶联来延伸所述肽的最终步骤d.。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述肽在环化过程中结合到固相，条件是，所述烯丙型保护基不作为树脂手柄，所述步骤d.的肽延伸是连续固相肽合成。

5.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述环化反应步骤b.在存在弱碱试剂和偶联剂时在质子惰性极性溶剂中进行。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述环化反应采用HCTU或TCTU或者采用苯并三唑的盐作为偶联剂进行。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述肽通过酸不稳定的键连接到树脂支持物上。

8.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述肽通过酸不稳定的键在其C末端共价连接。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述碱不稳定性保护基团是FMOC基团。

10.如权利要求1或7所述的方法，其特征在于，所述烯丙基和alloc保护基在存在烯丙基受体时通过Pd(0)催化除去，优选用Rl-Ph_nSiH_m作为烯丙基受体，所述受体是过量的，其中，R1是芳核上的取代基，并且是芳基、烷基或芳烷基，n是1或2，m是2或3，更优选其中的烯丙基受体是PhSiH₃。

11.一种如式II或III所示的具有用碱不稳定性保护基团保护的Nα的环肽，

其中，Y是碱不稳定性保护基团，n＝1-10，优选n＝1或2，最优选n＝1，此外，其中，m＝1-15，优选m＝3-6，最优选m＝3，此外，x＝1-200，q＝0-200，优选x＝3-50，q＝0-50，其中，R1和R2分别为天然氨基侧链或其非天然衍生物，所述侧链还可包含除烯丙基醚和烯丙氧基羰基保护基之外的保护基，且其中的A是树脂或树脂手柄，或者其中的R2任选为天然氨基侧链或其非天然衍生物，所述侧链通过醚、硫醚、酯、硫酯、酰氨基或者仲氨基或叔氨基部分结合到树脂或树脂手柄，条件是，此时A选自OH、NH₂、NR’1H或NR’1R’2，其中R’1和R’2独立为C₁-C₄烷基。

12.如权利要求11所述的肽，其特征在于，所述碱不稳定性基团是FMOC。

13.如权利要求11或12所述的肽，其特征在于，所述肽具有式II，其中n＝1或2，更优选n＝1。

14.如权利要求11-13中任一项所述的肽，其特征在于，A包括树脂手柄或树脂连接部分，但含有烯丙氧基羰基部分的树脂手柄除外。

15.如权利要求14所述的肽，其特征在于，所述树脂或树脂手柄具有式IV

其中，R是树脂，而R”1、R”2、R”3独立为氢、C₁-C₄烷基或C₁-C₄烷氧基，并且可以相同或不同，条件是，R”1和R”2中只有一个可以是氢，且其中L是氧、硫、氮、或具有式V