[发明专利]制备旋光醇的方法

说明书

描述

本发明涉及通过在醇脱氢酶存在时还原丁-2-酮来制备(S)-丁-2-醇的方法。

现有技术

已经描述了使用多种生物催化剂将丁-2-酮还原成丁-2-醇[J.Org.Chem.(1992)57：1526，Chemistry Letters(1987)2089，Arch.Biochem Biophys.(1992)292：539]。

但是，这些研究没有报道任何对映选择性。此外，还公开了R-丁-2-醇的制备[J.Am.Chem.Soc.(1986)108：162]。但是在此情形中，得到了只有48％ee的对映选择性。

Nakamura等人[Tetrahedron：Asymmetry(2003)14：2659，Tetrahedron：Asymmetry(2002)13：971]已经阐明了S-丁-2-醇的生物催化合成已经达到了94％ee的对映选择性。在这些研究中，使用干燥的白地霉(Geotrichumcandidum)细胞。但是没有详细描述催化上述反应的酶。

发明目标

目标是提供通过丁-2-酮的对映选择性还原制备(S)-丁-2-醇的方法，所述方法生产了高化学产量的具有最大对映纯度的(S)-丁-2-醇。

发明描述：

本发明涉及通过在醇脱氢酶存在时还原丁-2-酮来制备(S)-丁-2-醇的方法，所述醇脱氢酶

(i)具有多肽序列SEQ ID NO：2，或者

(ii)具有与SEQ ID NO：2的序列有至少80％同一性的多肽序列。

适合于本发明方法的醇脱氢酶(在下文中缩写为ADH)是那些能够在依赖NAD⁺的反应中氧化2-丙醇以提供2-丙酮的ADH。

另外，适合于本发明方法的ADH具有SEQ ID NO：2的多肽序列或与SEQ ID NO：2的序列有至少80％、优选是至少90％、特别优选是至少95％并且特别是至少97％、98％或99％同一性的序列。

具有SEQ ID NO：2的多肽是可从大肠杆菌(Escherichia coli)中得到的丙醇脱氢酶[Swissprot：基因座ADHP_ECOLI，登录P39451；GenBank ID48994873区：互补序列(1550852到1551892；[Science(1997)277：1453]。在实验部分中描述了此酶的分离。

其它适当的ADH是它们的多肽序列与SEQ ID NO：2有上述一种序列同一性的那些。

为了在本文中描述的目的，通过University of Wisconsin的GeneticsComputer Group(GCG)的“GAP”计算机程序确定序列同一性，所述程序使用版本10.3，使用GCG所建议的标准参数。