[发明专利]分析物的电化学分析改进方法

权利要求书

1.一种电化学检测样品中分析物的方法，所述方法包括：

(a)提供含有用导电聚合物层涂布的导电电极的传感器电极；

(b)在一定条件下使所述传感器电极与含有由于存在分析物而待检 测的样品的溶液接触，所述条件使得在导电聚合物层上形成包含分析物 和电化学活性标记物组分的电化学活性分析物复合体；

(c)使所述传感器电极和电化学活性分析物复合体与增进电化学活 性分析物复合体的电化学活性的电化学活性测量溶液接触；

(d)施加电流以在所述传感器电极上感生预定的保持电位；

(e)除去电流并且使所述传感器电极回复至开路静息电位；

(f)测量下列参数中的一个或多个，作为样品中存在的分析物的量 的指标：

(i)保持电位和开路静息电位之间的差，

(ii)所述传感器电极从保持电位回复至开路静息电位的速率，

(iii)将所述传感器电极保持在预定的保持电位所需的电流量。

2.根据权利要求1的方法，其中在步骤(d)中施加恒定的电流， 使得所述传感器电极保持在单一的预定保持电位下。

3.根据权利要求1的方法，其中在步骤(d)中所述电流是变化的， 使得所述传感器电极在预定的保持电位之前，保持在一个或多个不同的 电感应电位和/或开路电位下。

4.根据权利要求1-3任一项的方法，其中步骤(c)通过将所述传 感器电极从步骤(b)的包含样品的溶液转移至步骤(c)的测量溶液中 来进行。

5.根据权利要求1-3任一项的方法，其中步骤(c)通过向步骤(b) 的包含样品的溶液中加入过量的步骤(c)的测量溶液来进行。

6.根据权利要求1-3任一项的方法，其中所述电化学活性分析物复 合体的电化学活性标记物组分包含能够将底物转化为产物的酶，所述酶 的作用直接影响所述传感器电极的导电聚合物涂层的氧化还原组成。

7.根据权利要求6的方法，其中所述酶是辣根过氧化物酶、碱性 磷酸酶、脲酶、过氧化氢酶或葡糖氧化酶。

8.根据权利要求6的方法，其中所述酶能够将对传感器电极的导 电聚合物层的氧化还原组成没有可检测影响的底物转变成直接或间接 影响导电聚合物层的氧化还原组成的产物。

9.根据权利要求6的方法，其中所述酶能够将直接或间接影响传 感器电极的导电聚合物层的氧化还原组成的底物转变成对导电聚合物 层的氧化还原组成没有可检测影响的产物。

10.根据权利要求6的方法，其中所述酶能够将对传感器电极的导 电聚合物层的氧化还原组成没有可检测影响的底物转变成作为第二种 酶的底物的产物，第二种酶的作用产生第二种产物，所述第二种产物的 产生直接或间接影响传感器电极的导电聚合物涂层的氧化还原组成。

11.根据权利要求1-3任一项的方法，其中所述电化学活性分析物 复合体的电化学活性标记物组分包含具有下列特性的带电标记物：

a)在权利要求1的电化学活性测量溶液的pH下带有净电荷；和

b)当传感器电极处感生预定的保持电位时，这种电荷的量改变， 从而使颗粒根据其优选的电荷状态而带正电或负电。

12.根据权利要求11的方法，其中所述带电标记物是金、二茂铁或 胶乳微球。

13.根据权利要求1-3任一项的方法，其中所述传感器电极的导电 聚合物层含有固定在其中或吸附到其上的捕捉受体，所述捕捉受体能够 定量地结合样品中待检测的期望分析物。

14.根据权利要求13的方法，其中步骤(b)中电化学活性分析物 复合体的形成通过下面的步骤进行：

(b1)使传感器电极与包含样品的溶液接触，使得所述分析物结合被 固定化或被吸附的捕捉受体；

(b2)使传感器电极与包含第二受体的溶液接触，所述第二受体能够 在空间上不同于结合捕捉受体的位点的位点处结合分析物，所述第二受 体与标记物组分缀合。