[发明专利]用于抑制移植物排斥的方法和材料

说明书

相关申请的交叉参照

本申请要求2004年12月12日提交未决的美国申请系列号 10/964,215的优先权。

政府支持条款

本发明是在政府支持下，按国立卫生研究院授予的合约AI31231 完成的。美国政府在本发明中具有某些权利。

发明背景

1.发明领域

本发明涉及移植物排斥。特别地，本发明提供有益于抑制移植物 排斥的方法和组合物。

2.技术发展现状

当前处理移植后移植物排斥的策略一般涉及使用免疫抑制剂例如 环孢霉素A(CsA)、雷帕霉素、他克莫司(FK506)、皮质类固醇、 和白细胞介素(IL)-2受体的抗体。这些药物一般需要长期使用，导 致淋巴细胞整体耗尽，并增加严重感染、肾毒性、和癌症的风险。此 外，一些患者不能耐受这些免疫抑制剂足够抑制移植物排斥的剂量。

需要另外的移植物排斥抑制剂，尤其是那些对接收抑制剂的个体 不会整体耗尽淋巴细胞的抑制剂。

发明概述

本发明的一个实施方案提供在需要它的哺乳动物内抑制移植物排 斥的方法，包括：给该哺乳动物施用治疗有效量的抗体，其中该抗体 与多肽的细胞外结构域起免疫反应(immunoreacts)，此处的多肽是 指“脾表达的(SPEX)多肽”。一些实施方案中，本方法进一步包括 给该哺乳动物施用一种或多种另外的移植物排斥抑制剂。另外的移植 物排斥抑制剂的实例包括：CsA、雷帕霉素、FK506、皮质类固醇、和 IL-2受体抗体。

在抑制移植物排斥中使用本抗SPEX抗体的一个益处为对哺乳动 物，包括移植物接受者，施用抗SPEX抗体，不会整体耗尽该哺乳动 物的淋巴细胞。因此，本发明的一个实施方案提供在需要它的哺乳动 物内抑制移植物排斥的方法，包括：给该哺乳动物施用治疗有效量的 抗体，其中该抗体与SPEX多肽的细胞外结构域起免疫反应，和其中 给予该抗体不会显著的减少该哺乳动物的总CD4+T细胞计数、总CD8 T细胞计数、或总B细胞计数。

本发明的一个实施方案提供在表达SPEX多肽的淋巴细胞上减少 脾表达的(SPEX)多肽表达的方法，包括将该淋巴细胞接触与SPEX 多肽的细胞外结构域起免疫反应的抗SPEX抗体，从而减少该淋巴细 胞的SPEX多肽的表达。

本发明的一个实施方案提供在需要它的哺乳动物内抑制移植物排 斥的抗体的鉴定方法，包括：提供包含SPEX多肽的细胞外结构域表 位的氨基酸序列，其中所述的表位在长度上至少为六个氨基酸；对所 述的氨基酸序列产生抗体；和在移植物排斥模型中筛选所述的抗体， 从而鉴定出抑制移植物排斥的该抗体。

本发明的一个实施方案提供通过活化的淋巴细胞抑制白细胞介素 2(IL-2)分泌的方法，其中该淋巴细胞表达SPEX多肽受体(例如， SEQ ID NO：20或SEQ ID NO：62)，该方法包括将该淋巴细胞接触与 SPEX多肽受体的细胞外结构域起免疫反应的抗体(SPEX受体接合和 激活)。

本发明的一个实施方案提供通过表达脾表达多肽(SPEX多肽)受 体的活化淋巴细胞抑制白细胞介素-2受体(CD25)表达的方法，包括 将该淋巴细胞接触与SPEX多肽受体的细胞外结构域起免疫反应的抗 体。

本发明的一个实施方案提供表达SPEX多肽受体的预活化淋巴细 胞增殖的抑制方法，包括将所述淋巴细胞接触与SPEX多肽受体的细 胞外结构域起免疫反应的抗体。

附图说明

本附图构成本发明说明书的一部分。

图1提供具有细胞外、跨膜(交叉线画出阴影)、和细胞内结构 域(如所标记)的基本上全长小鼠和人SPEX多肽(分别为mSPEX和 hSPEX)的示意图。每个细胞外结构域包括免疫球蛋白(Ig)样结构 域(水平线画出阴影)和任选地具有可裂解的信号序列(虚线区域)， 其中箭头指向裂解位点。在翻译后加工过程中信号序列被切割掉以产 生成熟的SPEX多肽。每个细胞内结构域包括三个基于酪氨酸的基序 (垂直线画出阴影)。每个基于酪氨酸的结构域依次包括酪氨酸氨基 酸残基(Y，为酪氨酸单字母密码)。所给出的实施方案描述酪氨酸可 以任选地被磷酸化(带圆圈的P)。显示了SPEX多肽在生物膜中的相 对位置。斑点状区域表示在确定功能的结构域之间的每个多肽部分。