[发明专利]鲎抗内毒素因子模拟肽分子、其合成方法和用途

权利要求书

1.鲎抗内毒素因子模拟肽分子，其特征在于，可选自具有如下结构通式的序列肽：

(1)R X¹ NPT X² KRLK X³ KYKGK X³ WCP

X¹可以是F或M或I或L或V或N；

X²可以是E或M或A或L或K或F或Q或W或I或V；

X³可以是F或W或Y.

保持链长，性质相似氨基酸替换；4点替换；

(2)X⁴ INPT X² KR X¹ X⁴ X³ KYKGKFW

X¹可以是F或M或I或L或V或N；

X²可以是E或M或A或L或K或F或Q或W或I或V；

X³可以是F或W或Y；

X⁴可以是K或R或H或Z，其中Z为鸟氨酸Orn或高精氨酸hArg.

缩短碳链，删除碳端C W；5点替换；

(3)INPT X² KRLKW X⁴ YKGR X³ X³ CP

X²可以是E或M或A或L或K或F或Q或W或I或V；

X³可以是F或W或Y；

X⁴可以是K或R或H或Z，其中Z为鸟氨酸Orn或高精氨酸hArg

缩短碳链，删除氮端1个氨基酸；4点替换；

(4)PT X² KR X¹ KX³ KYKGKFWCP

X¹可以是F或M或I或L或V或N；

X²可以是E或M或A或L或K或F或Q或W或I或V；

X³可以是F或W或Y

缩短碳链，删除氮端3个氨基酸；5点替换；

(5)K X² NPTVKR X¹ K X³ RYKGKF

X¹可以是F或M或I或L或V或N；

X²可以是E或M或A或L或K或F或Q或W或I或V；

X³可以是F或W或Y

缩短碳链，删除碳端3个氨基酸；5点替换；

(6)NPX⁵VKR X¹ K X³ RYKGKF

X¹可以是F或M或I或L或V或N；

X³可以是F或W或Y；

X⁵可以是T或S或Y

缩短碳链，删除氮端2个氨基酸；3点替换。

2.权利要求1中所述的鲎抗内毒素因子模拟肽分子，其特征在于：表现为多肽的药学上可接受的各种无机酸、有机酸的盐类。

3.根据权利要求1中所述的鲎抗内毒素因子模拟肽分子，其特征在于：表现为多肽的链中或端位环肽。

4.根据权利要求3所述的鲎抗内毒素因子模拟肽分子，其特征在于：表现为各种多肽的链中或端位环肽的药学上可接受的各种无机酸、有机酸的盐类。

5.采用权利要求1-4之任意一项所述的鲎抗内毒素因子模拟肽分子制成的联合制剂，该联合制剂包括一种具有选择性地中和内毒素及抗菌活性尤其是中和内毒素功能的鲎抗内毒素因子模拟肽，或其药物学上可接受的盐，和一种在药物学上可接受的载体或赋形剂。

6.利用权利要求1-4之任意一项所述的鲎抗内毒素因子模拟肽辅以药用稀释剂、佐剂及载体制成片剂、粉剂、丸剂、溶液或悬浮剂药用组合物。

7.权利要求1-4之任意一项所述的鲎抗内毒素因子模拟肽在细菌杀灭药物和内毒素血症治疗药物中的应用。

8.采用至少两个相同或不同的权利要求1-4之任意一项所述的鲎抗内毒素因子模拟肽相连成一个肽在制备治疗G-细菌感染和内毒素血症药物中的应用。

9.权利要求1中所述的鲎抗内毒素因子模拟肽分子的制备方法，其特征在于：

(1)肽树脂的合成：

称取适量Fmoc-AA-Wang树脂或其它多肽合成氨基酸树脂倒入合成柱中，加入溶剂溶胀，以10％-50％六氢吡啶的DMF溶液脱除氨基酸树脂的Fmoc保护基团，用DCM、MeOH、DMF依次洗涤；按照本发明的抗菌/抗内毒素变构肽的氨基酸序列依次称取适量的Fmoc-氨基酸于适宜的容器中，加入适量DMF溶解，然后加入偶联剂TBTU/HOBt，HBTU/HOBt，DIC/HOBt，DCC/HOBt，DCC/HOSu，TBTU/ HOSu，PyBOP/HOBt，或BOP/HOBt和适量氮甲基吗啉或二异丙基乙胺的DMF溶液；偶联完成后，除去反应液，以DCM、MeOH、DMF、DCM、DMF依次洗涤肽树脂；加入20％-50％六氢吡啶的DMF溶液脱除氨基酸树脂的Fmoc保护基团，以DCM、MeOH、DMF依次洗涤；按照多肽固相化学合成方法依照本发明的鲎抗内毒素因子模拟肽母体的氨基酸序列从C端开始依次进行后续偶联，如此循环完成整个鲎抗内毒素因子模拟肽的肽链，得到母体肽树脂；充分洗涤，MeOH收缩，抽干，从合成柱中取出合成的鲎抗内毒素因子模拟肽树脂，置冻干机中冻干，备用；

(2)肽树脂的裂解：

取出合成的鲎抗内毒素因子模拟肽分子的肽树脂，加入适量裂解液，搅拌，反应2-5小时，无水乙醚沉降，离心；加入无水乙醚，搅匀，离心，重复6次，加水或醋酸水溶液，冻干；

(3)肽树脂的纯化

HPLC纯化，冻干或转盐后冻干，质谱仪测定分子量，HPLC检查纯度及离子含量，确证合格后装瓶。