[发明专利]中和碱性饮料工业废水的生物技术方法

权利要求书

1.一种细菌分离株微小杆菌(Exiguobacterium sp.)(MTCC5183)，其保藏在布达佩斯条约认可的国际保藏机构IMTECH，39A区，昌迪加尔，印度。

2.权利要求1的分离株，其中所述分离株能够在pH为10-12.00的培养基上生长。

3.权利要求1的分离株，其中所述细菌分离株能够在1-1.5小时的时间内将饮料工业废水12.0-11.5的高pH降低到中性pH(7.5-7.00)。

4.权利要求1的分离株，其中所述细菌分离株以1∶5-1∶10的比率用于将饮料工业废水的高pH(12.0-11.5)中和至中性pH(7.5-7.00)。

5.权利要求1的分离株，其中所述细菌分离株获自位于印度昌迪加尔饮料工业的流出物处理工厂的活性淤泥。

6.权利要求1的分离株，其中所述细菌分离株是革兰氏阳性的，非能动的，棒形和氧化酶阴性的，可以水解淀粉，和从甘油，纤维二糖，D-甘露糖，甘露醇，甲基α-D-葡糖苷，苦杏苷和熊果苷中产生酸。

7.一种制备细菌分离株微小杆菌(MTCC5183)的方法，所述微小杆菌用中和pH在12.00-11.5范围的饮料工业的碱性废水，其保藏在布达佩斯条约认可的国际保藏机构IMTECH，39A区，昌迪加尔，印度，所述方法包括以下步骤：

a)通过提供在碱性杆菌培养基中的淤泥提取物，富集被细菌污染的活性淤泥；

b)培养细菌；

c)在达到所需生长后，通过离心获自步骤(b)的培养物来分离细菌，以获得细菌细胞的沉淀；

d)将获自步骤(c)的沉淀溶解在磷酸盐缓冲液中；

e)通过加入从步骤(d)中获得的细菌沉淀来中和pH在12.00-11.5范围内的饮料工业碱性废水。

8.权利要求7的方法，其中所述被污染的活性淤泥获自位于印度昌迪加尔的饮料工业流出物处理工厂的管道。

9.权利要求7的方法，其中以1∶5-1∶10的活性淤泥：培养基的比率在100-120rpm，33-35℃下进行40-48小时的淤泥富集。

10.权利要求7的方法，其中在碱性杆菌培养基中，pH为11.00-12.00和37-34℃下进行细菌的培养。

11.权利要求7的方法，其中在达到通过光密度为1.5-2.0所证实的生长后，通过离心获自步骤(b)的培养物来分离细菌。

12.权利要求7的方法，其中通过取5-7g高压灭菌瓶中的新鲜活性淤泥进行淤泥的富集，所述高压灭菌瓶中含有100-110ml的淤泥提取物，50μlCandid B抗真菌和碱性杆菌培养基。

13.权利要求7的方法，其中通过在约4000rpm下离心无菌的淤泥混和物约20分钟来制备淤泥提取物。

14.权利要求7的方法，其中通过将活性淤泥以1∶5-1∶10的比率溶解在蒸馏水中，并在约15psi下高压灭菌约1小时来制备灭菌的淤泥提取物。

15.权利要求7的方法，其中碱性杆菌培养基包含比率约为1.0∶0.5∶1.0∶0.1∶1.0重量/体积的蛋白胨，酵母提取物，葡萄糖，K₂HPO₄和Na₂CO₃。

16.权利要求7的方法，其中淤泥提取物和碱性杆菌培养基的比率是1∶5-1∶10。

17.权利要求7的方法，其中在培养基、温度、pH和碳源的确定条件下培养所述分离的细菌分离株。

18.权利要求7的方法，其中在使用碱性杆菌培养基，接着在32-37℃/80-120rpm下温育8小时的确定的条件下培养所述细菌，用于中和碱性饮料工业废水。

19.权利要求7的方法，其中在达到通过光密度为2-2.5而证实的大量生长后离心生长的培养物。

20.权利要求7的方法，其中将细菌沉淀溶解在磷酸盐缓冲液中。

21.权利要求7的方法，其中将细菌微小杆菌用作全细胞。