[发明专利]特异性组蛋白在治疗寄生虫病中的应用

说明书

发明领域

本发明涉及组蛋白在治疗、诊断或预防寄生虫病中的应用。特别地，本发明涉及组蛋白H2A、H2B、H3和H4中的一或多种的这种应用。 

发明背景 

利什曼原虫原生动物(Leishmania protozoa)是专性细胞内寄生物，其感染其脊椎动物宿主的单核吞噬细胞系细胞。这些寄生物是利什曼病的病原学因素，利什曼病是一组特征在于人出现从自愈性皮肤溃疡至潜在的致命性内脏感染的各种临床表现(Herwardt，Lancet(1999)354：1191)。该疾病的发生及感染的传播根据遗传背景和感染的宿主的免疫系统的状态而在个体之间有很大不同。 

皮肤利什曼病的鼠模型已经广泛用于研究有效疫苗接种的需要。给予小鼠一些在DNA疫苗中编码的抗原在一些小鼠中产生疾病的预防作用(参见Handman，Clin.Microbiol.Rev.(2001)14：229)。使用编码蛋白质GP63、LACK和PSA-2的DNA进行的疫苗接种保护小鼠免于硕大利什曼原虫(L.major)感染(见例如Xu et al.，Immunology(1955)84：173)。另外，已经证实用表达蛋白质LACK、LmST11和TSA的质粒组合免疫可以高效对抗低剂量的硕大利什曼原虫攻击(Mendez etal.J.Immunol.(2001)166：5122)，而编码半胱氨酸蛋白酶CPa和CPb的两种质粒的混合物部分保护BALB/c小鼠对抗高剂量的硕大利什曼原虫攻击(Rafati etal.，Vaccine(2001)19(25-26)：3369)。大多数保护实验限于实验室水平及动物模型。因此，由于缺少在真实的宿主动物中 的现场研究，没有确定的证据表明所述候选物将会是成功的疫苗。 

应注意产生良好抗体效价的抗原(即免疫原性的抗原)并不总是以及由其自身提供对抗疾病的保护作用。相反，对抗抗原的一些抗体或细胞应答可以与保护作用相关，而对抗该抗原的其它抗体或细胞应答可以与疾病的易感性和/或恶化相关。另外，保护性作用通常需要佐剂，因为没有佐剂的抗原可以产生抗体应答，但不提供保护作用。见例如Stacey和Blackwell(Infect Immun.1999Aug；67(8)：3719-26)，其报道了为小鼠皮下接种单独的可溶的利什曼原虫抗原(SLA)、SLA加上明矾、或者SLA加上含有免疫刺激性CG基序的非寡脱氧核苷酸(ODN)(CpG ODN)，产生与未接种的小鼠相比恶化的疾病。接受SLA加上CpG ODN的小鼠与SLA接种的小鼠相比示出高度显著的保护性作用，与未接种的小鼠相比示出增强的存活力。 

意味着物种特异性表位的利什曼原虫物种间的抗原多样性也许是基于各个抗原产生疫苗的一个缺陷(Handman，2001，参见前文)。已知DNA疫苗仅仅针对从中获得该DNA的物种起保护作用。Melby及其同事在Infect Immun.(2000)68：5595中报道了用编码杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)蛋白质的cDNA表达文库和亚文库进行免疫保护小鼠对抗杜氏利什曼原虫所致疾病的VL形式。Gurunathan etal.，J.Exp.Med.(1977)186:1137报道了接种编码来自硕大利什曼原虫的免疫优势LACK(激活的C激酶的受体的利什曼虫同源物)寄生物抗原的DNA产生对抗硕大利什曼原虫的保护作用。Melby et al.InfectImmun.(2001)69：4719示出这种抗原不使小鼠产生对抗婴儿利什曼原虫(Leishmania infantum)的保护作用。他们还报道了尽管杜氏利什曼原虫p36(LACK)DNA疫苗是高度免疫原性的，但其对试验性内脏利什曼病无保护作用。免疫原性分子不产生保护作用即不导致感染清除或者缓解临床症状的这个现象是对发现一种良好疫苗的挑战之一。如果免疫原性或抗原性分子总是自动提供保护作用，则容易发现疫 苗。发现可以用于针对一种以上物种的疫苗更加是一种挑战。 

发明详述 

本发明涉及组蛋白H2A、H2B、H3和H4中的任一种在治疗、诊断或预防寄生虫病中的应用。在一个实施方案中，只使用H4。优选地，使用组蛋白H2A、H2B、H3或H4中的两或多种，更优选使用这些组蛋白中的三或多种，最优选使用所有这四种组蛋白H2A、H2B、H3或H4。