[其他]调节基因表达的核被膜和核纤层结合嵌合体

权利要求书

1、一种核酸靶特异性嵌合蛋白质，其包含一或多个可以特异性结合于与靶基因相关联的核苷酸序列的第一结构域和一或多个可以与核周边相关联的第二结构域，其中至少一个所述第一结构域与至少一个所述第二结构域是异源的。

2、权利要求1的嵌合蛋白质，其中所述一或多个第一结构域包含一个锌指蛋白(ZFP)、一个人工锌指蛋白(AZP)、一个亮氨酸拉链蛋白、一个螺旋-转角-螺旋蛋白、一个螺旋-环-螺旋蛋白、一个同源盒结构域蛋白、任何一种上述蛋白的DNA结合部分、或其任意组合。

3、权利要求2的嵌合蛋白质，其中所述AZP包含至少一个锌指，如果存在其它的指，则所述至少一个锌指的指独立地通过0到10个氨基酸残基共价连接于所述其它的指，其中所述锌指的α-螺旋的-1，2，3和6位的氨基酸如下进行选择：

在-1位，氨基酸是精氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、甲硫氨酸或谷氨酸；

在2位，氨基酸是丝氨酸、天冬酰胺、苏氨酸或天冬氨酸；

在3位，氨基酸是组氨酸、天冬酰胺、丝氨酸或天冬氨酸；及

在6位，氨基酸是精氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、酪氨酸、亮氨酸或谷氨酸。

4、权利要求2或3的嵌合蛋白质，其中所述AZP包含至少一个锌指，每个锌指独立地表示为式-X₃-Cys-X_2-4-Cys-X₅-Z^-1-X-Z²-Z³-X₂-Z⁶-His-X_3-5-His-X₄-，如果存在其它的指，则所述至少一个锌指的指独立地通过0到10个氨基酸残基共价连接于所述其它的指；其中

X独立地是任何氨基酸且Xn表示多肽链中X出现的次数；

Z^-1是精氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、甲硫氨酸或谷氨酸；

Z²是丝氨酸、天冬酰胺、苏氨酸或天冬氨酸；

Z³是组氨酸、天冬酰胺、丝氨酸、或天冬氨酸；及

Z⁶是精氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、酪氨酸、亮氨酸或谷氨酸。

5、权利要求4的嵌合蛋白质，其中

Z^-1是精氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸或谷氨酸；

Z²是丝氨酸、天冬酰胺、苏氨酸或天冬氨酸；

Z³是组氨酸、天冬酰胺、丝氨酸、或天冬氨酸；及

Z⁶是精氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸或谷氨酸。

6、权利要求4或5的嵌合蛋白质，其中至少一个所述锌指的X位包含来自Zif268锌指、Sp1指或Sp1C指的相应的氨基酸。

7、权利要求1的嵌合蛋白质，其中所述一或多个第一结构域包含至少3个锌指，每个锌指表示为式-Pro-Tyr-Lys-Cys-Pro-Glu-Cys-Gly-Lys-Ser-Phe-Ser-Z^-1-Ser-Z²-Z³-Leu-Gln-Z⁶-His-Gln-Arg-Thr-His-Thr-Gly-Glu-Lys-，所述指直接互相结合，其中

Z^-1是精氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、甲硫氨酸或谷氨酸；

Z²是丝氨酸、天冬酰胺、苏氨酸或天冬氨酸；

Z³是组氨酸、天冬酰胺、丝氨酸、或天冬氨酸；及

Z⁶是精氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、酪氨酸、亮氨酸或谷氨酸。

8、权利要求7的嵌合蛋白质，其中

Z^-1是精氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸或谷氨酸；

Z²是丝氨酸、天冬酰胺、苏氨酸或天冬氨酸；

Z³是组氨酸、天冬酰胺、丝氨酸、或天冬氨酸；及

Z⁶是精氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸或谷氨酸。