[发明专利]细胞因子敷料

说明书

技术领域

本发明属医用生物材料技术领域，具体涉及一种包含细胞因子的敷料。

背景技术

在人们的日常生活、工作和各种疾病手术以及意外伤害中，经常发生不同程度的皮肤损伤。由于皮肤是维持机体内环境和阻止细菌入侵的屏障，皮肤受损后造成一个开放性创面，使其抵御外来微生物侵袭的屏障作用丧失，极易引起局部与全身感染，加重病情甚至危及生命。因此在皮肤损伤时急需采用敷料来覆盖和保护创面并提供有利于愈合的环境。传统敷料纱布具有保护创面、吸收渗液、制作简单的特点，在临床上一直广泛使用并沿用至今。但该类敷料仅起单纯覆盖创面的作用，而且由于敷料本身性能的缺陷常常会延缓创面愈合的进程，如易与创面渗液形成干痂，创面愈合缓慢；换药时疼痛，且易损伤新生组织；敷料纤维易脱落造成异物影响愈合，肉芽组织易长入纤维网眼中；被渗液浸透时病原微生物易通过等。研制生产一种既能克服上述缺点达到高效保护创面、又能促进组织修复加速创面愈合的新型现代敷料，是市场和社会的迫切需要。

在创面愈合过程中，细胞因子是目前已知能发挥诱导和刺激细胞增殖、维持细胞存活等生物效应的一类极其重要的蛋白类物质。尽管细胞因子在体外显示出优良的促进创伤修复细胞增殖的活性，但将它直接应用于治疗表面伤口时不能收到良好效果。其主要原因是：①通常细胞因子活性半衰期只有数小时或更短，而在创伤局部细胞因子与细胞接触必须超过一定时间才能有效发挥作用；②细胞因子作为多肽等，在室温和有水情况下是非常不稳定的，加上伤口部位存在的蛋白酶对细胞因子的降解作用，使细胞因子丧失其生物活性。因此，在现有条件下将细胞因子直接用于伤口部位时存在严重的缺点，即细胞因子常会由于机体内环境而失活，达不到所期望的加速创面愈合的效果。这就要求开发出一个能在活体内持续运输释放的系统以保持细胞因子作用于创伤细胞的时间。

发明内容

本发明的目的在于：针对上述问题，本发明提供了一种细胞因子敷料，对细胞因子进行基体包埋，能稳定连续地持久释放细胞因子，可以达到保护细胞因子在活体创面环境下仍保持活性的目的。当用这种含细胞因子的复合胶原海绵制剂覆盖创面时，增加了皮肤与细胞因子的接触面积和接触时间，可以缓慢而均匀地释放细胞因子到伤口部位，创造出一种仿效创面生理性愈合的环境条件，收到很好的加速创口愈合的效果。

本发明方案是在支架敷料上均匀植入细胞因子，使之含量为1μg/cm²～1000μg/cm²。细胞因子是能够促进伤口愈合和组织再生的生物制剂，它可以是天然提取或基因重组。细胞因子的种类可以是表皮细胞因子(EGF)、血小板衍生细胞因子(PDGF)、转化细胞因子(TGF)、和生长激素(GH)等的一种或数种。

为了使复合胶原海绵达到最佳的改良性能，在复合胶原溶液中可以加入各种选择性附加剂。为提高柔韧性，可使用适当的增塑剂如甘油、聚乙二醇，其用量可以是所含敷料支架重量的1％到30％。

为了提高细胞因子活性的稳定性，可加入合适的稳定剂如甘露醇、乳糖、葡萄糖等大多数糖类稳定剂，期量可以是所含敷料支架重量的0.5到10％。

为了防止细胞因子和受体被创面蛋白酶很快降解，可加入一种蛋白酶抑制剂如丝氨酸蛋白酶抑制剂，其用量可以是所含敷料支架重量的0.5到5％。

为产生与所用细胞因子活性成分相容的pH值，可使用多数通用的生物缓冲剂如乙酸盐、磷酸盐、枸橼酸盐，其用量可以是所含敷料支架重量的0.01到2％，适当的pH值通常是5到7左右。

本发明所述敷料可进一步包含能促进伤口愈合的细胞因子基因刺激活性细胞等。

本发明的优点在于：细胞因子的敷料具有传统敷料纱布无法比拟的综合品质，即提供仿效正常皮肤的屏障功能和接近生理愈合的局部环境，在高效、安全地覆盖和保护创面的同时，发挥强大的加速伤口愈合和组织再生的功效。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明进行详细说明。

实施例1：

第一步：选用已制备好的海绵敷料作为支架，规格为(长×宽×厚)：6cm×5cm×0.5cm(亦可选用其它任一形式的敷料作为支架)。(此海绵支架约重0.36g)

第二步：采用PCR技术扩增人细胞因子cDNA片段，与原核表达载体组装成高效表达质粒，转化大肠杆菌后用温度诱导细胞因子基因的表达，发酵扩增工程菌后破碎菌体，收集上清纯化获得纯品，选择性添加甘油0.01g、甘露醇0.01g、丝氨酸蛋白酶抑制剂0.005g后，经无菌过滤、分装，2～8℃保存备用。或者天然制备细胞因子。