[发明专利]光合细菌制剂的制备方法无效
| 申请号: | 02110316.X | 申请日: | 2002-04-30 |
| 公开(公告)号: | CN1384188A | 公开(公告)日: | 2002-12-11 |
| 发明(设计)人: | 许继光 | 申请(专利权)人: | 许继光 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N13/00 |
| 代理公司: | 蚌埠鼎力专利代理有限责任公司 | 代理人: | 王琪 |
| 地址: | 233010 安徽省蚌*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 光合 细菌 制剂 制备 方法 | ||
技术领域
本发明提供一种光合细菌制剂的制备方法。
技术背景
公开号为CN1104250A的中国发明专利申请公开说明书披露了一种高活性的浑球红假单胞菌(Rhodopseudomonas Sphaeroides)P4株和沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas Palustris)1号株混合制剂的制备方法,该方法为:在菌种培养液中接种30%以上的两株菌株的混合菌群,接种后的培养液在温度为26~32℃、光照强度为3000~5000LX、PH为6~8的厌氧条件下培养48~72小时,然后将培养出的菌液在敞开体系中、自然光照下,根据菌液中的碳源残存量适时添加一次以上的碳源,在温度为20~35℃、好氧充气条件下培养72~120小时后,收集菌液分装,制成液体微生物混合制剂。可见,对于经过厌氧培养的菌液来说,在后续的制备过程中需根据该菌液中的碳源残存量适时添加一次以上的碳源,并在好氧充气条件下进行培养,这样,一则需添置碳源检测设备和充氧设备,以至设备投资大,生产成本增加,二则需凭操作工的实践经验适时进行多次检测及添加碳源,以至操作繁琐、使用起来很不方便,产品质量难以保证。
发明内容
本发明的目的在于提供一种生产成本低、使用方便的光合细菌制剂的制备方法。
本发明所提供的光合细菌制剂的制备方法依次包括以下工艺步骤:光合细菌与菌种培养液按容积比为(0.8~1)∶(1~1.2)的比例混合得混合液,混合液在温度为20~38℃、光照强度为2000~6000LX、PH为6~7的厌氧条件下培养100~140小时,然后将厌氧条件下培养出的菌液在温度为20~38℃的条件下按以下方式培养24~72小时,所述方式为:每日凌晨4时至当日下午5时在自然光照的厌氧条件下培养、每日下午5时至次日凌晨4时在敞开体系中培养,当菌液的活菌浓度达到5×109个/ml以上时,制成光合细菌制剂。
所述光合细菌至少为红假单胞菌属(Rhodopseudomonas)、着色菌属(Chroiatium)中任意一属或两属的菌株。
所述菌种培养液的组成为:乙酸钠250~350g,氯化铵13~17g,磷酸氢二钾21~29g,硫酸镁9~11g,氯化钠4.5~5.5g,钼酸铵45~55g,酵母浸膏7.4~8.6g,氯化钙2.7~3.3g,三氯化铁1.2g,水30000~50000g。
以上所说的光合细菌均可外购。
以上所说的敞开体系是指敞口的培养容器。
以上所说的菌种培养液,其组成成分之一的水采用净清河水、井水、自来水中任意一种均可,但净清河水、井水中诸如悬浮物含量、BOD值、大肠杆菌数等各项指标,均需符合出厂自来水的标准。
采用以上的方法后,对于厌氧条件下培养出的菌液来说,在其后续的制备工艺步骤中无需添加碳源,也无需在好氧充气条件下进行培养,这样,一则不需添置碳源检测设备和充氧设备,以至设备投资小,生产成本低,二则降低了操作工的操作难度,以至操作简单、使用起来相当方便。
具体实施方式
下面通过实施例更好地说明本发明,但它们不是对本发明的限定。
实施例一:
从惠州市惠山水生生物制品有限公司分别购得红假单胞菌(Rhodopseudomonas sp.)的DL·1-3菌株及着色菌(Chroiatium sp.)的HQ菌株,将这两个菌株按容积比1∶1的比例混合得混合菌群。需要说明是:惠州市惠山水生生物制品有限公司从中国科学院水生生物研究所处引进了公开号为CN1162016A的中国发明专利申请技术,并进行了工业化转化生产及销售。在公开号为CN1162016A的中国发明专利申请公开说明书中披露了红假单胞菌(Rhodopseudomonas sp.)的DL·1-3菌株及着色菌(Chroiatiumsp.)的HQ菌株的菌种保存编号分别为CCTCCM 96018和CCTCCM96017。惠州市惠山水生生物制品有限公司地址为:广东省惠州市环城西一路二十号A座四楼;
配制菌种培养液,其组成为:乙酸钠350g,氯化铵17g,磷酸氢二钾29g,硫酸镁11g,氯化钠5.5g,钼酸铵55g,酵母浸膏8.6g,氯化钙3.3g,三氯化铁1.2g,净清河水50000g;
用购得并经混合的混合菌群与菌种培养液按容积比为0.8∶1.2的比例混合得混合液并置于洁净的带盖塑料桶中,混合液在温度为38℃、光照强度为6000LX、PH为7的厌氧条件(即盖上所述塑料桶的桶盖,以下实施例同此)下培养100小时;
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