[发明专利]血纤维蛋白溶解系统激活蛋白

说明书

本发明涉及用于治疗和预防与血栓生成及微循环障碍有关疾病的新型溶栓药物。本发明还涉及其他缺血性以及微循环障碍疾病的治疗。此外，本发明还涉及用于血纤维蛋白溶解系统激活蛋白测定的分析方法和试剂盒、血纤维蛋白溶解系统激活蛋白特异性抗体。

本世纪八十年代未九十年代初出现全球性的老年社会，而危害中老年人生命的第一杀手就是心脑血管疾病。据世界卫生组织(WHO)统计，全世界每年约有1200万人死于心脑血管疾病。中国中风发病率约219/10万，患病率为761/10万，全国约有900万人患有中风，在发病人数中约有2/3为缺血性中风，其血栓的形成是导致缺血性中风和其它一些心脑血管疾病的主要原因，据分析从八十年代初至九十年代初十年间，由于我国人在饮食结构、体力活动强度和其他工作生活条件的较大变化，按过去十年有关心脑血管发病因素的增长；情况，有关专家保守的估计，到二十一世纪初，我国中风发病率将上升60％，冠心病发病率将上升80％。

为此，科学家为寻求治疗血栓疾病的药物付出了极大的努力。目前应用于治疗血栓疾病主要有：链激酶、尿激酶、蛇毒蛋白。但是距离人类抵抗这类疾病的要求还远远不够。

1986年，日本科学家美源恒首次应用现代生物技术方法提取蚯蚓中溶栓活性成分。确认口服蚯蚓粗蛋白提取物对血栓溶解、预防血栓形成以及降低血液粘度等方面有效。并且分离了六种蛋白酶组分，申请了专利——US4,568,545。认为血栓溶解的活性组分就是这六个组分其中之一或几个的组合。这六个蛋白酶组分分别是：

F-O-HM-45        分子量：24,500±2,000道尔顿

F-I-1-HM-54      分子量：27,500±2,000道尔顿

F-I-2-HM-15      分子量：27,000±2,000道尔顿

F-II-HM-64       分子量：27,800±2,000道尔顿

F-III-1-HM-27    分子量：32,400±2,000道尔顿

F-III-2-HM-89    分子量：32,800±2,000道尔顿

在此基础上，我国科学家在90年代初推出了蚯蚓粗蛋白提取物口服溶栓胶囊，目前在我国有多家大型制药企业生产该类药物，如“江中制药”的“博洛克”、“青岛双龙”的“普恩复”等等。

在此之后，对蚯蚓中溶栓活性有效组分的确定方面有大量的研究工作。但是，蚯蚓中溶栓活性组分的最终确定的研究一直没有进一步的进展。使蚯蚓的药用功能进一步应用受到限制。

本发明涉及新的蛋白质和它的用途。此蛋白质是能激活体内纤溶系统的特异性的蛋白酶。使用该蛋白酶用于全身治疗可以溶解已生成的血栓和抑制血栓的生成，显示出强大的抗血栓活性。同时，该蛋白质有改善微循环的作用。提供治疗由血栓形成引起的疾病和微循环障碍有关疾病的方法。

本发明的另一个目的是提供一种检测蚯蚓或蚯蚓提取物中血纤维蛋白溶解系统激活蛋白的存在和量检测方法及试剂盒。

本发明的另一个目的是提供用于检测和定量体液中存在的血纤维蛋白溶解系统激活蛋白的特异性抗体的方法。

本发明的另一个目的是提供对包含血纤维蛋白溶解系统激活蛋白分子的特异性区域具有选择性的血纤维蛋白溶解系统激活蛋白抗体的组合物。

本发明的另一个目的是提供用于检测和定量血纤维蛋白溶解系统激活蛋白生物合成的组合物。

本发明的另一个目的是提供检测和定量体中存在的血纤维蛋白溶解系统激活蛋白目标物的存在和数量的方法。

通过阅读下面公开的发明技术解决方案的详细描述和附加的权利要求后本发明的这些目的和其它目的以及特性和优点就会变得明显了。

本发明中的蛋白质的分子量大约为16200道尔顿(16.2kDa)，与专利US4,568,545中所指蛋白质由明显的不同。本发明中的蛋白质由蛋白酶的活性，在体内有明显增强体内纤溶作用、促进血栓溶解；对血液流变学指标有明显改善；而且不影响凝血系统和抗凝指标。此蛋白的特征还在于特殊的N-末端氨基酸序列，这种蛋白质的N-端头十个氨基酸序列(seq ID No：1)如下：

本发明所指的血纤维蛋白溶解系统激活蛋白是具有上述特征的蛋白质，

    Cys·Arg·Arg·Glu·Phe·His·Ile·Ala·Ser·Glu

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