[发明专利]一种多肽——骨骼发育相关蛋白－43.23和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——骨骼发育相关蛋白-43.23，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

本发明公开了一种新的多肽——骨骼发育相关蛋白-43.23，编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于诊治多种疾病的方法，如多指(趾)，并指(趾)畸形，马碲内翻足，多囊肾，异位肾，马碲肾等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其诊治作用。本发明还公开了编码这种新的骨骼发育相关蛋白-43.23的多核苷酸的用途。

在脊髓动物的骨骼发育中，尚未分化的间叶细胞分化形成软骨细胞是一个重要的过程。研究发现，鼠的胚胎纤维原细胞链C3H10T1/2，在特殊的培养条件和处置下会分化成下列细胞的任何一种：肌细胞，脂肪细胞，造骨细胞和软骨细胞。最近，从尚未分化的C3H10T1/2分离克隆出一条新基因cors26，(Maeda T，Abe M，KurisuK，Jikko A，Furukawa S.Osaka University，1-8 Yamadaoka，Suita，Osaka 565-0871，Japan.)此基因编码了26-kDa的蛋白。CORS26的氨基酸序列由246个氨基酸组成，在氨基末端并含有一个包含成胶域的分泌信号肽缩氨酸(Gly-X-Y repeats)，在COOH端含有含有一个完整的C1q球状域，CORS26在结构上和脂肪动员激素特效性蛋白很接近。由于和补体因子亚单位C1q结构上很相似，所以它被认为是C1q蛋白家族成员。Northern blot分析发现CORS26的mRNA在发育中的肋骨组织中浓度很高而在成熟的软骨细胞中并没有发现，所以它被认为是早期的骨骼发育中的分泌蛋白，为了进一步阐明CORS26蛋白在骨骼发育过程中的功能作用，以发育中的鼠软骨作为研究对象，证明CORS26既对于软骨发育非常重要，而且对于C3H10T1/2的分化形成也至关重要。因此，CORS26的这种特性将软骨发育和细胞分化发育相联系起来，对于骨骼的分布及其生长清晰度具有相当重要的决定作用。

本发明的人的基因属于C1q蛋白家族，在蛋白水平上与CORS26有36％的相同性及62％的相似性。基于以上各点，故认为本发明的蛋白为CORS26，命名为骨骼发育相关蛋白-43.23。并以此推断其与CORS26相似，并具有相似的生物学功能。在体内，其表达异常可引起软骨发育和细胞分化发育异常，进而导致与软骨发育和细胞分化发育功能紊乱相关的疾病的发生。

由于如上所述骨骼发育相关蛋白-43.23蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的骨骼发育相关蛋白-43.23蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新骨骼发育相关蛋白-43.23蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——骨骼发育相关蛋白-43.23以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码骨骼发育相关蛋白-43.23的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码骨骼发育相关蛋白-43.23的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产骨骼发育相关蛋白-43.23的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——骨骼发育相关蛋白-43.23的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——骨骼发育相关蛋白-43.23的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与骨骼发育相关蛋白-43.23异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。