[发明专利]一种多肽——人谷胱甘酸转移酶－26.73和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人谷胱甘酸转移酶-26.73，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

谷胱甘肽转移酶(GSTs)是第二阶段酶家族的成员，它利用谷胱甘肽做出对生物转化以及对大范围内部与外部成分部署的反应，这些成分包括化学致癌物质、治疗药物、氧化压的产物。谷胱甘肽转移酶的表达水平以及调节它们的因子具有显著的生物学及临床作用。一些GSTs的过表达显示出对一些抗癌药物的抵制作用，另一方面，遗传所决定的GSTs缺乏对于白内障和一些癌的形成构成威胁。GSTM1的等位基因的纯和性能作为孩童时期急性淋巴细胞白血病的成功治疗以及可以长期幸存的肯定的预兆指示剂。影响GSTP1-1底物特殊性的遗传多肽对于帕金森病构成威胁。

哺乳动物的胞质GSTs分为六个明显的类别为Alpha、Pi、Mu、Sigma、Thetahe和Zeta，在植物、昆虫和其它种类中也存在其他类型的分类。虽然一些不同类型的GST的分类物质表现出重叠性，但是其它物质具有高度的特殊性。尽管在这个家族中被调节的底物具有多样性，然而许多GSTs是通过他们与异型生物质1-氯-2、4-二硝基苯的反应活性以及连接谷胱甘肽亲和力的活性来识别。用来识别谷光甘肽转移酶家族新成员的办法是比较它们的序列相似性而不是底物特殊性，并且我们已经找到了一个包含超过10⁶人类表达序列标签的数据库。

通过这个方法鉴定出分类为Omega的谷光甘肽转移酶：一群具有新结构和功能特性的GSTs。我们已经鉴定了一个人类cDNA，表达和定性了这个重组蛋白，并且鉴定出它具有2.0-A的分辨率。重组的人类Omega GST(GSTO 1-1)表现出具有谷胱甘肽依赖的硫醇转移酶的活性以及具有催化脱氢抗坏血物质中谷胱甘肽依赖物的减少的特性。这些活性并不是与其它人类GSTs有关而是与谷氧环蛋白的特性有关的。这种分类为Omega的谷光甘肽转移酶的一个特别的N末端延长端以及它的晶体结构能表现出活性的半胱氨酸残基的位置从而区别于其它真核GSTs所具有的酪氨酸和丝氨酸残基的特性。

本发明的人的基因与人编码的谷胱甘酸转移酶Omega基因在蛋白水平上有63％的同一性和77％的相似性。故认为本发明的新蛋白为一种新的人的谷胱甘酸转移酶，命名为人谷胱甘酸转移酶-26.73，并以此推断其与人的谷胱甘酸转移酶Omega相似，同为谷胱甘酸转移酶家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人谷胱甘酸转移酶-26.73蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人谷胱甘酸转移酶-26.73蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人谷胱甘酸转移酶-26.73蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人谷胱甘酸转移酶-26.73以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人谷胱甘酸转移酶-26.73的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人谷胱甘酸转移酶-26.73的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人谷胱甘酸转移酶-26.73的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人谷胱甘酸转移酶-26.73的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人谷胱甘酸转移酶-26.73的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人谷胱甘酸转移酶-26.73异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。