[发明专利]一种多肽——人核孔蛋白－39.6和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人核孔蛋白-39.6，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

核孔复合物(NPC)是一个嵌入核包膜的120Mda的分子结构，作为核子以及细胞质间的细胞双相传输器，它起到了极其特殊的作用。核孔蛋白的两个主要的重复序列群：FXFG和GLFG四肽重复序列，在酵母以及高等真核细胞中都能找到，虽然证据显示它们提供了核子位电信号接受器复合物对亲核传输物质做出回应的对接位点，但具体的功能并不清楚。核孔蛋白的另一个部分并不包含重复序列，但他们中的一些具有特征性序列，这些序列包括跨膜序列、亮氨酸拉链结构、锌指结构、RN连接序列等。

通过对核孔蛋白反应成分的基因筛选，分离除了一个新的核孔蛋白Nup84p，它与哺乳动物的Nup107p具有同源性。Nup84p形成了含有五个蛋白的复合体：Nup84p、Nup85p、Nup120p、Sec13p以及Sec13p的同源体。分离了Sec13p-Prot之后，核孔蛋白仍旧互相联系，而破坏了任何一个编码Nup84p、Nup85p、Nup120p的基因，都将导致核膜与核孔复合体组织的失常，同样的情况也会发生在多聚ARNA转化体上。Nup84p复合体与Sec13p蛋白的连接对于修正核孔蛋白的起源有帮助的。

本发明的人的基因与酵母编码的核孔蛋白基因在蛋白水平上有35％的同一性和56％的相似性。故认为本发明的新蛋白为一种新的人的核孔蛋白，命名为人核孔蛋白-39.6，并以此推断其与酵母的核孔蛋白相似，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人核孔蛋白-39.6蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人核孔蛋白-39.6蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人核孔蛋白-39.6蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人核孔蛋白-39.6以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人核孔蛋白-39.6的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人核孔蛋白-39.6的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人核孔蛋白-39.6的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人核孔蛋白-39.6的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人核孔蛋白-39.6的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人核孔蛋白-39.6异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中32-1114位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-3417位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人核孔蛋白-39.6蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与人核孔蛋白-39.6蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。

本发明也涉及一种药物组合物，它含有本发明多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。