[发明专利]制备旋光的3－羟基吡咯烷衍生物的微生物法

说明书

已经公开过制备旋光的3-羟基吡咯烷衍生物的数种方法。这些方法中有一些涉及通过与旋光有机酸形成盐将外消旋3-羟基吡咯烷衍生物拆分。日本专利申请Nos.96-103965、92-77749和84-185583都描述了用旋光有机酸拆分外消旋3-羟基吡咯烷衍生物的方法。还公开了拆分外消旋3-羟基吡咯烷衍生物的酶促方法[Hasegawa等，对映异构体(Enantiomer),2(3～4):311～314(1997)；日本专利申请No.87-301052]。这些酶促方法涉及用水解酶立构有择水解外消旋N-苄基-3-酰氧基吡咯烷。其它方法涉及旋光母体的化学改性。欧洲专利申请No.95-110685公开了一种制备旋光的3-羟基吡咯烷衍生物的方法，即，通过用活化的碱氢硼化物还原旋光的3-羟基吡咯烷-2,5-二酮。另一种方法涉及旋光的丁酸酯衍生物的化学改性(欧洲专利申请No.91-303245)。还报导了一种用真菌轮生小克银汉霉(Cunninghamella verticillata)VKM F-430从苯基-吡咯烷-1-基甲酮制备(-)-(3-羟基-吡咯烷-1-基)-苯基-甲酮的微生物法[Parshikov等，杂环化合物化学(Khimiya GeterotsiklicheskikhSoedinenii)，2:195～199(1992)]。另一种微生物法报导了通过用食油假单胞菌(Pseudomonas oleovorans)Gpo1和其它细菌的种使N-苄基吡咯烷羟基化而制备旋光的N-苄基-3-羟基吡咯烷[Li等，四面体：不对称现象(Tetrahedron:Asymmetry)10:1323～1333(1999)]。

在一个实施方案中，本发明涉及一种从式Ⅰ的化合物生产式Ⅱ的化合物的方法，该方法包括：在至少一种由微生物生产的羟化酶(hydroxylatingenzyme)存在下使式Ⅰ的化合物羟基化。

在一个优选的实施方案中，本发明涉及一种方法，其中，所述微生物选自：

赭曲霉(Aspergillus ochraceus)ATCC 18500，

金霉素链霉菌(Streptomyces aureofaciens)ATCC 10762，

刺孢小克银汉霉雅致变种(Cunninghamella echinulata v.elegans)ATCC 8688b，

刺孢小克银汉霉雅致变种ATCC 8688a，

刺孢小克银汉霉刺孢变种(Cunninghamella echinulata v.echinulata)ATCC 9244，

Cunninghamella homothallica ATCC 16161，

刺孢小克银汉霉雅致变种ATCC 36112，

刺孢小克银汉霉刺孢变种ATCC 36190，

刺孢小克银汉霉雅致变种ATCC 10028b，

刺孢小克银汉霉雅致变种ATCC 9245，

刺孢小克银汉霉雅致变种ATCC 8983，

刺孢小克银汉霉雅致变种ATCC 26269，

Pithomyces cynodontis ATCC 26150，

灰绿犁头霉(Absidia glauca)ATCC 22752，

白僵菌(Beauveria bassiana)ATCC 7159，

诺卡氏菌(Nocardia sp.)ATCC 53758，

龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus)ATCC 55043，以及

龟裂链霉菌ATCC 23955。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种从式Ⅰ的化合物生产式Ⅱ的化合物的方法，该方法包括：在至少一种由小克银汉霉属(Cunninghamella)的种的微生物生产的羟化酶存在下使式Ⅰ的化合物羟基化。

优选的是这种方法：其中，所述小克银汉霉属的种是刺孢小克银汉霉雅致变种。

还优选的是这种方法：其中，所述刺孢小克银汉霉的种是刺孢小克银汉霉雅致变种ATCC 8688b。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种从式Ⅰ的化合物生产式Ⅲ的化合物的方法，该方法包括：在至少一种由曲霉属(Aspergillus)微生物的培养物生产的羟化酶存在下使式Ⅰ的化合物羟基化。

优选的是这种方法：其中，所述曲霉属培养物是黄柄曲霉(Aspergillus flavipes)。

还优选的是这种方法：其中，所述黄柄曲霉培养物是黄柄曲霉ATCC16795。