[发明专利]氧化还原酶同工酶诊断试剂盒的制备

权利要求书

1、一种氧化还原酶同工酶诊断试剂盒的制备，做醋酸纤维素薄膜电泳，其包括有：

(1)、配制0.04～0.1mol/L电极液，PH为7.5-9.0；

(2)、配制0.04～0.2mol/L泡显色膜缓冲液；

(3)、冰乙酸做为固定液，用时加水稀释；其特征在于：如(2)所述的泡显色膜缓冲液分装安瓿B；如(3)所述的固定液分装安瓿F；

(4)、配制泡电泳膜缓冲液分装安瓿A：按重量百分比，其是取三羟甲基氨基甲烷7.4％～83.3％、乙二胺四乙酸8.3％～78.4％、氯化钠4.2％～68.6％加水溶解，加盐酸调pH7.0～9.0，加水100～1000ml，用时加水稀释5～25倍；

(5)配制显色液

(a)、将0.5～1.5mol/L底物和0.05～0.5mol/L缓冲液，底物与缓冲液混合分装安瓿C，按其体积比为2.0％～50％∶50.0％～98.0％；

(b)、将辅酶I的固体粉末和硝基兰四氮唑的固体粉末分装安瓿D；

(c)、将吩嗪甲酯偏硫酸固体粉末分装安瓿E；其中所述辅酶I的固体粉末、硝基兰四氮唑的固体粉末和吩嗪甲酯偏硫酸固体粉末，按重量百分比，其比例分别为5.8％～93.7％，6.2％～94.0％，0.5％～9.0％，用时将安瓿C、D、E混合即为显色液。

2、一种氧化还原酶同工酶诊断试剂盒的制备，做琼脂糖凝胶电泳，其包括有：

(1)、配制0.04～0.1mol/L电极液，PH为7.5-9.0；

(2)、冰乙酸做为固定液，用时加水稀释；其特征在于：如(2)所述的固定液分装安瓿F；

(3)、配制泡电泳膜缓冲液分装安瓿A：如权利要求1所述的安瓿A内分装的泡电泳膜缓冲液的配制；

(4)、配制琼脂糖凝胶：将琼脂糖或琼脂、如(3)所述的泡电泳膜缓冲液、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮分装安瓿B，其中琼脂糖或琼脂、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮，按重量百分比分别为7.0％～36.4％，52.6％～91.0％，1.4％～19.4％，然后再加入80～120ml的泡电泳膜缓冲液，加热溶解，趁热分装，制备为安瓿B；

(5)配制显色液

(a)、将0.5～1.5mol/L底物和0.05～0.5mol/L缓冲液，底物与缓冲液混合分装安瓿C，按其体积比为2.0％～50％∶50.0％-98.0％；

(b)、将辅酶I的固体粉末和硝基兰四氮唑的固体粉末分装安瓿D；

(c)、将吩嗪甲酯偏硫酸固体粉末分装安瓿E；其中所述辅酶I的固体粉末、硝基兰四氮唑的固体粉末和吩嗪甲酯偏硫酸固体粉末，按重量百分比，其比例分别为5.8％～93.7％，6.2％～94.0％，0.5％～9.0％，用时将安瓿C、D、E混合即为显色液。

3、根据权利要求1或2所述的一种氧化还原酶同工酶诊断试剂盒的制备，其特征在于所述底物用乳酸或乳酸盐类物质，显示乳酸脱氢酶同工酶；底物用苹果酸或苹果酸盐类物质，显示苹果酸脱氢酶同工酶；底物用乙醇、丙醇、n-丁醇或n-戊醇，显示乙醇脱氢酶同工酶；底物用异柠檬酸或异柠檬酸盐类，显示异柠檬酸脱氢酶同工酶；底物用葡萄糖-6-磷酸或葡萄糖-6-磷酸的盐类，显示葡萄糖-6-磷酸脱氢酶同工酶；底物用谷氨酸或谷氨酸的盐类，显示谷氨酸脱氢酶同工酶。

4、根据权利要求2所述的一种氧化还原酶同工酶诊断试剂盒的制备，其特征在于所述的(4)琼酯凝胶的配制：内装琼脂糖也可以为琼脂、如(3)所述的缓冲液、其是将0.5g-1g加入80～120ml的缓冲液，加热溶解，趁热分装，制备分装安瓿B；

5、根据权利要求1或2所述的一种氧化还原酶同工酶诊断试剂盒的制备，其特征在于所述安瓿C中的缓冲液可以是磷酸盐缓冲液也可以用Tris-HCL或Tris-顺丁烯二酸缓冲液。

6、根据权利要求1或2所述的一种氧化还原酶同工酶诊断试剂盒的制备，其特征在于所述安瓿D中的辅酶I可用辅酶II代替，硝基兰四氮唑(NBT)可有噻唑兰(MTT)、碘代硝基四唑(INT)代替。

7、根据权利要求1或2所述的一种氧化还原酶同工酶诊断试剂盒的制备，其特征在于所述安瓿D也可混合溶解后制备为冻干试剂，所述冻干试剂的制备：将辅酶I和硝基兰四氮唑按重量百分比，为5.8％～93.7％、6.2％～94.0％，加水溶解后分装于安瓿内，进行冷冻干燥后再加入0.5％～9.0％吩嗪甲酯偏硫酸，制备为安瓿F。