[发明专利]一种多肽——性别决定蛋白－85.69和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——性别决定蛋白-85.69，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

C.elegans的雌雄同体种系的性别的决定是在转录后调控的。从精子发生到卵子发生的转换依赖于fem-3性别决定基因的调控，这个基因的调控通过fem-3基因3’端不翻译区域的一个调控因子。以前的研究成果已经表明，fem-3基因3’端不翻译区域的抑制作用至少需要6种mog基因，其中的一条基因mog-1编码一种DEAH盒蛋白。现在已有报道其中的mog-4和mog-5基因的克隆，并且发现mog-4和mog-5基因同样可以编码DEAH盒蛋白。对于mog-4和mog-5基因的确定是通过基因图谱以及对每个基因的错义诱变。种族发育的分析结果表明，C.elegans的mog-1、mog-4以及mog-5基因编码的MOG-1、MOG-4及MOG-5蛋白分别与酵母蛋白PRP16、PRP2以及PRP22非常相似。鉴于其能够影响fem-3调控性别以及它们与PRP16、PRP2以及PRP22蛋白的相似性，可以推断MOG-1、MOG-4及MOG-5蛋白在转录后调控中起作用，可能是通过改变核蛋白络合物的构造来实现[Puoti，A.& Kimble，J.(2000)Proc Natl.Acad.Sci.U.S.A.97(7)：3276-81]。

本发明的蛋白与上述的MOG-5蛋白在蛋白水平上有39％的同一性和59％的相似性，且具有该蛋白的保守的序列片段，因而被认为是一种新的蛋白，命名为性别决定蛋白-85.69。其突变或表达异常将导致相关蛋白的表达异常，进而引发各种相关的疾病。

由于如上所述性别决定蛋白-85.69蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的性别决定蛋白-85.69蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新性别决定蛋白-85.69蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——性别决定蛋白-85.69以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码性别决定蛋白-85.69的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码性别决定蛋白-85.69的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产性别决定蛋白-85.69的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——性别决定蛋白-85.69的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——性别决定蛋白-85.69的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与性别决定蛋白-85.69异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中42-2381位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2813位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制性别决定蛋白-85.69蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与性别决定蛋白-85.69蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。