[发明专利]一种多肽——碱基错配修正蛋白－11.22和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——碱基错配修正蛋白-11.22，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

对生命状态的存在和延续来说，DNA分子要求保持高度的精确性和完整性。细胞中不但有能精密复制DNA分子的机制，还有能够修复发生错误的DNA的系统。这种错误包括双链DNA分子的错配等。修复碱基错配的第一步是识别错配的碱基。在大肠杆菌中，这一过程由MutS蛋白完成。MutS蛋白与DNA双链在错配处结合，并在MutL和MutH蛋白的协同下，靶至其中一条DNA链的切除处。其他的蛋白将这一段DNA从DNA链上切下来并降解。

在真核生物中有许多种MutS蛋白。例如，在酵母中有6中MutS蛋白。其中两种(MSH4和MSH5)并不参与错配碱基的修复，而是参与有丝分裂期染色体的交叉互换和分离。MSH2、MSH3和MSH6参与错配碱基的修复，又各有侧重。MSH6偏重于识别碱基：碱基的错配，MSH3侧重于识别大环结构，而MSH2在这些过程中都是必须的。MSH1的功能还不是很清楚，但它似乎参与线粒体的碱基错配修复。在许多别的真核生物中也发现了MutS的多种碱基错配修正蛋白。

人类的hMSH蛋白在快速增殖的细胞中表达量最高，并且与细胞的持续分化有关。在直肠内的纤维原周边细胞中也发现了高表达。人类的MutS蛋白的缺失会导致遗传性非息肉性直肠癌(HNPCC)和其他的一些原发性癌症。

MutS蛋白家族的特征同源序列是：[ST]-[LIVMF]-x-[LIVM]-x-D-E-[LIVMFY]-[GC]-[RKH]-G-[GST]-x(4)-G。

由于如上所述碱基错配修正蛋白-11.22蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的碱基错配修正蛋白-11.22蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新碱基错配修正蛋白-11.22蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——碱基错配修正蛋白-11.22以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码碱基错配修正蛋白-11.22的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码碱基错配修正蛋白-11.22的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产碱基错配修正蛋白-11.22的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——碱基错配修正蛋白-11.22的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——碱基错配修正蛋白-11.22的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与碱基错配修正蛋白-11.22异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1084-1392位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2408位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制碱基错配修正蛋白-11.22蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。