[发明专利]一种新的多肽——人葡萄糖胺－6－磷酸异构酶25.74和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

氨基己糖是构成细胞结构的生物大分子，如糖蛋白，糖脂和硫酸多糖等的结构基础。氨基己糖还参与糖分解通路，例如将葡萄糖胺-6-磷酸转变为果糖-6-磷酸，影响能量代谢。

葡萄糖胺-6-磷酸异构酶催化将葡萄糖胺-6-磷酸转化为果糖-6-磷酸。这是利用乙酰氨基葡萄糖胺的最后一步。这一步需要N-乙酰-D-葡萄糖胺来活化。从催化机制上来说，这个酶属于醛酮异构酶，但是它的反应也包括氨基化/去氨基化。因此，这个酶又称为葡萄糖胺-6-磷酸去氨基酶(GNPDA)。

对葡萄糖胺-6-磷酸异构酶的结构的研究表明，此酶的蛋白折叠可以看作是经过修饰了的NAD-结合结构域。通过对酶结构的研究也提出了去氨基反应的机理：首先此酶打开底物的吡喃环，然后再进行异构化和去氨基化。一段位于中心位置的序列在进化上十分保守，这一序列包含一个保守的组氨酸，对打开吡喃环起重要作用。这一段序列是：[LIVM]-x(3)-G-x-[LIT]-x-[LIV]-x-[LIVM]-x-G-[LIVM]-G-x-[DEN]-G-H

另外，位于72位的天冬氨酸在反应中起到关键的质子交换的作用。

哺乳动物的GNPDA最先是在小鼠的精子细胞中发现的。后来在大脑、肝脏、肾脏、肌肉、卵巢、睾丸和精子中都有发现。在精子细胞中，GNPDA位于顶体小泡的发生位置附近。在顶体发生时可以观察到GNPDA的含量减少或消失。因此GNPDA可能还在顶体反应中起一定的作用。【FEBS Lett 1999 Sep17；458(2)：141-4】在人体中，除了在上述的组织和器官中发现以外，还在红细胞中发现。【Br J Haematol 1995 Sep；91(1)：72-9】

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74。

由于如上所述人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人葡萄糖胺-6-磷酸异构酶25.74异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中26-730位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1961位的序列。