[发明专利]一种新的多肽——人RNA解旋酶32.34和编码这种多肽的多核苷酸无效
申请号: | 01105150.7 | 申请日: | 2001-01-10 |
公开(公告)号: | CN1364892A | 公开(公告)日: | 2002-08-21 |
发明(设计)人: | 毛裕民;谢毅 | 申请(专利权)人: | 上海博德基因开发有限公司 |
主分类号: | C12N9/14 | 分类号: | C12N9/14;C12N15/55;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/34;C12Q1/68;A61K38/46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多肽 rna 解旋酶 32.34 编码 这种 多核苷酸 | ||
本发明属于生物技术领域,具体地说,本发明描述了一种新的多肽——人RNA解旋酶32.34,以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。
在细胞的众多活动中,RNA结构的调控如:前体RNA的剪接、剪接体的装配、蛋白翻译等都是必需的。这些过程通常由各种不同的RNA解螺旋酶来调节完成。不同来源的RNA解螺旋酶构成了一很大的蛋白家族,在很多RNA起重要作用的生物系统中均可检测到该酶的存在。它们广泛地分布于从原核生物(包括病毒)到低等及高等生物的各组织器官中,参与细胞核及线粒体的分裂、RNA的编辑、rRNA的加工、转录起始,细胞核mRNA的转运及mRNA的降解等过程。RNA解螺旋酶被认为是细胞发育及分化过程中的重要因子,其中的一些还在病毒单链RNA的转录及复制过程中起作用[Arri Eisen,John C.Lucchesi,Bioessays,1998,20:634-641]。其在生物体内为癌症、神经系统疾病及免疫系统疾病的诊断、预防及治疗提供了有效的手段。
RNA解螺旋酶根据其结构上的特征分为不同的亚家族,亚家族I和亚家族II。所有的解螺旋酶均含有两个Walker型NTP结合结构域---A结构域(或叫ATP酶A结构域)和B结构域(或称ATP酶B结构域)。亚家族I中的成员含有保守的ATP酶A结构域:GXXXXGKT。后发现,有一些RNA解螺旋酶的ATP酶结构域A在一些氨基酸位点上有突变,其ATP酶A结构域的保守序列为:AXXGXGKT,因而将这些蛋白分为一类,即亚家族II。在亚家族II中,有部分蛋白在ATP酶结构域B中含有保守的DEAD盒,后发现该亚家族中的成员按其DEAD盒的不同又可分为三种不同的亚类,即DEAD盒蛋白、DEAH盒蛋白及DEXH盒蛋白[Angelika Luking,Ulf Stahl et al.,1998,Crit.Rev.Biochem.Mol.Biol.,33:259-296]。
1995年,Zhang S.等人从牛内克隆得到了NDHII蛋白,该蛋白为含DEAD盒的RNA解螺旋酶家族的成员。在其结构域II中含有DEIH基序,该蛋白与人解螺旋酶A及果蝇的Mle蛋白亦有较高的同源性。这三者均被认为在细胞核DNA及RNA的代谢过程中起重要作用[Zhang S.,Maacke H.et al.,1995,J.Biol.Chem.,270:16422-16427]。RNA解螺旋酶A在生物体内即具有RNA螺旋酶活性又具有DNA螺旋酶活性。因而,该酶在RNA的转录调节过程中起着重要的生物学功能[Lee CG,Eki T et al.,1998,Genomics,47:365-371]。由上可知,含DEAD盒的RNA解螺旋酶蛋白家族的成员在RNA的转录调节过程中起着重要的生物学功能,该类蛋白的表达异常将引发一些因转录调节异常而引起的代谢紊乱症、各种免疫系统疾病及一些相关组织的恶性疾病。
通过基因芯片的分析发现,在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾,胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中,本发明的多肽的表达谱与人RNA解旋酶的表达谱非常近似,因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人RNA解旋酶32.34。
由于如上所述人RNA解旋酶32.34蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用,而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白,因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人RNA解旋酶32.34蛋白,特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人RNA解旋酶32.34蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础,因此分离其编码DNA是非常重要的。
本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人RNA解旋酶32.34以及其片段、类似物和衍生物。
本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。
本发明的另一个目的是提供含有编码人RNA解旋酶32.34的多核苷酸的重组载体。
本发明的另一个目的是提供含有编码人RNA解旋酶32.34的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。
本发明的另一个目的是提供生产人RNA解旋酶32.34的方法。
本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人RNA解旋酶32.34的抗体。
本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人RNA解旋酶32.34的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。
本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人RNA解旋酶32.34异常相关的疾病的方法。
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