[发明专利]一种新的多肽——人丝氨酰－tRNA合成酶14.52和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人丝氨酰-tRNA合成酶14.52，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

DNA所荷载的蛋白质信息通过转录作用生成mRNA只完成了基因表达的一部分，更为复杂的一部分就是翻译过程，也就是核酸语言转变为蛋白质语言的过程。这一过程的主要角色有各种氨酰基-tRNA合成酶，各种tRNA和核糖体。由于它们的共同作用，氨基酸才能按照mRNA所提供的信息相互连接成为多肽链。一组同功tRNA由同一种氨酰基-tRNA合成酶催化而携带氨基酸。对于大多数tRNA来说，氨酰基-tRNA合成酶并非识别反密码子，而是识别其他某个部位，即tRNA的副密码子。

氨酰基-tRNA合成酶家族含有20种成员，由许多结构相似的tRNA及氨基酸中的特异选择性而区分。在较高等的真核生物中，除去九种不同种类的氨酰基-tRNA合成酶，还有与一种多酶复合物有关的丝氨酰-tRNA合成酶。氨酰基-tRNA合成酶可分为两类：I类酶的催化域具有核苷酸结合Rossmann折叠结构，而II类酶的催化域由七链的反平行β-折叠模板构成，包括缬氨酰-，异亮氨酰-，亮氨酰-，及甲硫氨酰-tRNA合成酶，I类酶在末端腺苷的2’-OH位催化其关联tRNA的氨酰化。II类酶具有三个特征序列模板；模板1参与二聚体的形成；模板2与3是活性位点部分，包括脯氨酰-，苏氨酰-，丝氨酰-，赖氨酰-及天冬氨酰-tRNA合成酶，II类酶在末端腺苷的3’-OH位催化其关联tRNA的氨酰化。丝氨酰-tRNA合成酶属于二类酶，是α二聚体。此外，真核生物的氨酰基-tRNA合成酶含有N-端延伸，但只有真核生物的异亮氨酰-tRNA合成酶及丝氨酰-tRNA合成酶具有额外的C-末端域[Christine Vincent，Nicolas Tarbouriech et al.，1997，Eur.J.Biochem，250：77-84]。

丝氨酰-tRNA合成酶的模板2与3对活性位点的形成起到极为重要的作用，N-端域参与tRNA识别，延伸的C-末端域富含亮氨酸残基，影响酶与底物的亲和性及稳定性。人丝氨酰-tRNA合成酶的核苷酸序列与原核生物丝氨酰-tRNA合成酶的N-末端二级结构不同，其中插入了外显子4，改善了tRNA的特异性识别。人丝氨酰-tRNA合成酶两个主要识别成分是鉴别基点G73与长的外臂。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人丝氨酰-tRNA合成酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人丝氨酰-tRNA合成酶14.52。

由于如上所述人丝氨酰-tRNA合成酶14.52蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人丝氨酰-tRNA合成酶14.52蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人丝氨酰-tRNA合成酶14.52蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人丝氨酰-tRNA合成酶14.52以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人丝氨酰-tRNA合成酶14.52的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人丝氨酰-tRNA合成酶14.52的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人丝氨酰-tRNA合成酶14.52的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人丝氨酰-tRNA合成酶14.52的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人丝氨酰-tRNA合成酶14.52的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人丝氨酰-tRNA合成酶14.52异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：