[发明专利]一种新的多肽——人染色体精氨酸转运ATP酶45.98和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人染色体精氨酸转运ATP酶45.98，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

亲水分子在细菌细胞膜中的转运由特殊的转运系统介导：它存在于细胞膜中，由一个或多个载体蛋白组成。这些系统允许细胞结合养分时不形成大的浓度梯度而消耗代谢能量。

大肠杆菌K-12中精氨酸的转运由2个转运系统介导：一个是转运精氨酸和鸟氨酸(AO系统)，另一个是转运赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸(LAO系统)。每个系统都包含了一个特殊的外胞质结合蛋白，即AO结合蛋白和LAO结合蛋白[Celis，R.T.F.et al.，1973 J.Bacteriol.116：619-626]。这两个系统又包含了一个共同的内膜转运蛋白，它可以水解ATP并且使两个外胞质结合蛋白磷酸化。最近，有报道发现第三个精氨酸外胞质转运系统[Wissenbach，V.，etal.，1995.Mol.Microbiol.17：675-686]。

外胞质转运系统存在于革兰氏阴性菌，该系统偶联ATP结合，ATP在转运中水解各种各样原核生物体的溶解物包括氨基酸、糖、多肽、多糖以及无机盐。细菌外胞质通透酶十分复杂，一种观点认为外胞质结合蛋白作为一个受体起作用，它识别引入的底物，并且决定了系统的选择性。蛋白-底物复合物和内膜复合物(通常右3-4个蛋白组成)相互作用[Boos，W.，and J.M.Lucht.1996 ABCtransporters，p.1175-1209]。

大肠杆菌K-12的内在ATP酶活性和细胞对精氨酸、鸟氨酸和赖氨酸的结合程度有关。而酶活性的缺失直接导致AO转运系统和LAO转运系统中蛋白-底物复合物水平的减少，这显示了ATP酶活性在这两个转运系统运作过程中的重要性。最近，已分离出一个对毒效应有抵抗力的刀豆氨酸突变体，它的转运活性和两个外胞质结合蛋白磷酸化水平都很低[Celis，R.T.F.1990.J.Biol.Chem.265：1787-1793]。

编码转运ATP酶的基因已被克隆并测序，该基因有一个可以编码268个氨基酸的开放阅读框架，分子量为29.3Kda。该酶蛋白的氨基酸序列包含了两个短的motif，它们组成了核苷酸结合折叠。

本发明新的多肽与大肠杆菌染色体精氨酸转运ATP酶在蛋白水平上有91％的同一性和95％的相似性，且具有相似的生物学功能和结构，因而被命名为人染色体精氨酸转运ATP酶45.98。

由于如上所述人染色体精氨酸转运ATP酶45.98蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人染色体精氨酸转运ATP酶45.98蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人染色体精氨酸转运ATP酶45.98蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人染色体精氨酸转运ATP酶45.98以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人染色体精氨酸转运ATP酶45.98的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人染色体精氨酸转运ATP酶45.98的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人染色体精氨酸转运ATP酶45.98的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人染色体精氨酸转运ATP酶45.98的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人染色体精氨酸转运ATP酶45.98的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人染色体精氨酸转运ATP酶45.98异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。